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臺盼藍溶液0.4%
產品貨號：C0040
儲存條件：4℃，12個月
產品性質
別名：錐藍或錐蟲藍
分子式：C34H24N6Na4O14S4
分子量：960.81
CAS:72-57-1
產品描述
臺盼藍是一種陰離子型染料。Trypan blue不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色，即產生所謂的拒染現象,而死亡細胞的細胞膜通透性增加，可使染料通過細胞膜進入細胞內，使死細胞著色呈藍色，是常用的檢測細胞活率的方法。通常認為細胞膜完整性喪失，即可認為細胞已經死亡，這與中性紅作用相反。因此，借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中常用的死細胞鑒定染色方法之一。
Trypan blue stain(0.4%)常用于檢測細胞膜的完整性以及細胞是否存活。活細胞不會被染成藍色，而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照后計數，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量，0.4%為常用的濃度。
自備材料：PBS 細胞ji數板 顯微鏡
參考步驟
1、收集細胞:
如為貼壁細胞，應用yi蛋白酶- EDTA溶液消化細胞，收集細胞。
如果收集懸浮細胞，則可以直接收集細胞。收集好的細胞在1000~ 2000g離心1min , 棄上清，用1mIPBS重新懸浮細胞沉淀。
2、臺盼藍染色:
吸取100μl細胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內,加入100μl Trypan blue stain(0.4%)輕輕混勻，靜置染色3min(染色時間可適當延長，但不宜超過10min)。
3、細胞計數:
吸取經過染色后的細胞，用血細胞ji數板計數。通常如果要比較精確地進行定量，每個細胞樣品至少需要數500個細胞,數出藍色細胞和細胞總數。細胞存活率計算公式如下:
細胞存活率= (細胞總數-藍色細胞數)/細胞總數x 100%
注意事項
1、Trypan blue stain對人體有輕微毒性,請注意小心防護。
2、注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現象。
3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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