反轉錄試劑盒 II
MCE 國際站：RT Master Mix for qPCR II
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件： -20℃ 2 年避光保存，避免反復凍融。
簡介：RT Master Mix for qPCR II 采用升級款反轉錄酶，反應更高效、快速，適用于高 GC 含量、復雜二級結構、少量 RNA 模板等。即用型預混液，一步操作即可完成反轉錄反應，簡便、快捷。
概述：MCE RT Master Mix for qPCR II 是一款高效、快速的反轉錄試劑。本品為即用型預混液，含有反轉錄反應所需的所有組分 (高性能 Reverse Transcriptase, RNase Inhibitor, Oligo dT Primer, Random Primer, RT Buffer, dNTPs Mix)，只需加入 RNA 和 RNase-free H2O 即可快速高效完成反轉錄反應，減少操作過程中的污染幾率。本品使用升級款逆轉錄酶，可耐受高達 60℃的反應溫度，適合具有復雜二級結構的 RNA 模板的反轉錄；與模板的親和力增強，適用于少量模板以及低拷貝基因的反轉錄反應。反轉錄產物 cDNA 可直接用于 PCR 或 real time quantitative PCR (qPCR)，與 MCE SYBR Green qPCR Master Mix (HY-K0501)配合使用即可進行高性能的基因表達分析。
描述：
MCE RT Master Mix for qPCR II 是一種方便、即用型逆轉錄配方。4× Super RT Mix 包含第一鏈 cDNA 合成所需的所有試劑。添加 RNA 后，優化的系統將提供靈敏可靠的 cDNA 合成。此外，高級逆轉錄酶的耐熱性增強，使逆轉錄可以在更高的溫度下進行，從而提高 cDNA 合成的效率和特異性。
第一鏈 cDNA 合成完成后，cDNA 產物可直接用作標準 PCR 和 qPCR 中的模板。MCE SYBR Green qPCR Master Mix (HY-K0501) 是檢測感興趣基因表達水平的選項。
特點：
1. 快速、特異性地合成 cDNA。
2. 僅需一步轉移，可顯著減少操作錯誤。
3.優化的緩沖液可提高 cDNA 合成的靈敏度和可靠性。
4. 即使模板量很少，也能實現超高效的反應（總 RNA：20 μL 反應中 50 pg -5 μg）。
5. 該試劑盒同時提供 Oligo dT Primer 和 Random Primer。
操作說明：1. 反轉錄反應體系配制(20 μL體系)在 RNase-free PCR 管中，配制 RT 反應液，反應液配置操作請在冰上進行。2. 反轉錄程序設置將上述配制的 Mix 混合均勻后，置于 PCR 儀中進行反應注：反轉錄溫度：推薦使用 55oC。對于高 GC 含量模板或者結構復雜模板，可將反轉錄溫度提高到 60oC3. 反應結束后，置于冰上冷卻。合成的 cDNA 可立即用于后續 PCR 或 qPCR 反應，也可 -20oC 短期保存，若需長期保存，建議分裝后，于 -80oC 保存，避免反復凍融
注意事項：1. 4× Super RT Mix 含有高濃度的甘油，使用前請短暫離心收集到管底部，并用移液槍輕輕吸打充分混勻后，準確吸取。2. 建議 RNA 模板溶解于水中。3. 反應液的配制，請在冰上操作完成。4. RNA 相關操作等請使用全新 RNase-free 槍頭、RNase-free 離心管等實驗耗材。建議 RNA 實驗使用的器具、試劑和無菌水等專用，避免 RNase 污染。5. 高質量、完整的 RNA 對于獲得高質量的 cDNA 至關重要，為保證反轉錄成功，請使用高質量的 RNA 模板。提取的 Total RNA 中常混有 gDNA，而 gDNA 可以直接作為 PCR 模板進行擴增，造成解析結果不準確。請在引物設計時避免 gDNA 擴增，或在提取 Total RNA 后使用 DNase I 處理以除去 gDNA，也可選購 MCE RT Master Mix for qPCR II (gDNA digester plus) (HY-K0511A)試劑盒，以消除 gDNA 對 PCR 擴增的影響。6. 本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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