鎳磁珠

鎳磁珠是一種廣泛應用于生物技術領域的磁性微球，主要用于蛋白質的純化。這類磁珠通常由鎳離子(Ni2+)飽和的硅基磁珠制成，具有結合容量和穩定性，特別適用于異源蛋白純化。

鎳磁珠的特點和優勢

結合容量：鎳磁珠相比于鈷磁珠展現出較高的蛋白結合容量，特別是在處理高表達的異源蛋白時，其優勢更為明顯。

易于自動化操作：鎳磁珠的使用可以實現不同體積濃度目標蛋白的一步高通量純化，且易于自動化操作。

可重復使用：鎳磁珠可以反復使用，再生工藝簡單，這大大降低了純化成本和環境污染的風險。

穩定性：鎳磁珠可以在變性條件下使用，例如在6MGuanadine或8MUrea的存在下，其結構穩定，不易受到競爭性小分子的影響。

適用范圍廣：鎳磁珠適用于多種細胞類型和環境下的組氨酸標簽蛋白純化，包括大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞和動物細胞表達的組氨酸標簽蛋白。

鎳磁珠的應用流程

使用鎳磁珠進行蛋白質純化的一般流程如下：

樣品處理：首先，需要對細胞或細胞提取物進行破碎和裂解，以釋放目標蛋白。然后，將粗蛋白樣品與預處理的鎳磁珠進行結合。

磁珠預處理：鎳磁珠需要先進行預處理，包括充分混勻和磁性分離，以確保其表面均勻地吸附目標蛋白。

目標蛋白與磁珠結合：將粗蛋白樣品加入裝有預處理鎳磁珠的離心管中，輕輕翻轉離心管數次，使磁珠懸浮，并在旋轉混合儀上室溫旋轉混合一段時間。然后，將離心管置于磁性分離器上進行磁性分離，移出上清液至新的離心管中。

磁珠洗滌：通過連續洗滌步驟，使用不同的緩沖液去除非特異性結合的蛋白質和其他雜質。洗滌過程通常包括加入洗滌緩沖液到裝有磁珠的離心管中，輕輕翻轉離心管數次，使磁珠重新懸浮，然后進行磁性分離。

目標蛋白洗脫：最后，通過逐步增加洗脫緩沖液中的咪唑濃度，逐漸釋放結合在鎳磁珠上的目標蛋白。當目標蛋白全部洗脫時，收集洗脫液到新的離心管中，即得到純化的目標蛋白樣品。

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