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血磷（Serum Phosphorus） 在臨床生化檢測(cè)中，主要指的是血液中以溶解狀態(tài)存在的無(wú)機(jī)磷（Inorganic Phosphorus, IP）。這些無(wú)機(jī)磷主要以無(wú)機(jī)磷酸鹽（包括 HPO?2? 和 H?PO?? 離子，其比例受血液 pH 值影響）的形式存在于血清或血漿中，是體內(nèi)磷元素參與生理活動(dòng)（如骨骼礦化、能量代謝、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、構(gòu)成核酸與磷脂等）的主要循環(huán)形式。

臨床上常用的血磷濃度測(cè)定方法，其核心原理是基于鉬藍(lán)法（Molybdate Blue Method）。該方法的檢測(cè)流程通常包括以下關(guān)鍵步驟：

1. 去除有機(jī)磷干擾： 首先，需對(duì)血清樣本進(jìn)行預(yù)處理，通常使用蛋白沉淀劑 或通過(guò)其他方法（如超濾）去除血清中的蛋白質(zhì)以及有機(jī)磷化合物（例如磷脂、磷酸酯、核酸等）。這一步至關(guān)重要，因?yàn)槟繕?biāo)檢測(cè)物是無(wú)機(jī)磷酸鹽，有機(jī)磷的存在會(huì)干擾后續(xù)的特異性顯色反應(yīng)。

2. 磷鉬酸復(fù)合物形成： 處理后的上清液（含有目標(biāo)無(wú)機(jī)磷酸鹽）與鉬酸銨（Ammonium Molybdate） 試劑反應(yīng)。在酸性條件下（通常由反應(yīng)體系中的酸提供，如硫酸），無(wú)機(jī)磷酸鹽（PO?3?）與鉬酸根離子（MoO?2?）結(jié)合，生成黃色的磷鉬酸（Phosphomolybdic Acid, H?[P(Mo?O??)?]） 雜多酸復(fù)合物。

3. 還原顯色（鉬藍(lán)形成）： 生成的黃色磷鉬酸復(fù)合物本身顏色較淺或不穩(wěn)定，不適合直接精確比色。因此，需要加入還原劑（常用抗壞血酸 Ascorbic Acid。還原劑將雜多酸中的鉬（Mo??）部分還原成較低價(jià)態(tài)的鉬（如 Mo?? 和 Mo?? 的混合價(jià)態(tài)），形成一種穩(wěn)定且具有強(qiáng)吸光度的鉬藍(lán)（Molybdenum Blue） 化合物。此化合物呈現(xiàn)鮮明的藍(lán)色。

4. 比色定量： 藍(lán)色的鉬藍(lán)化合物在可見(jiàn)光區(qū)具有特征性的最大吸收峰，其最大吸收波長(zhǎng)通常在 600 nm 至 700 nm 范圍內(nèi)，最常選用的檢測(cè)波長(zhǎng)為 620 nm 或 650 nm。使用分光光度計(jì)在選定波長(zhǎng)（如 620 nm）下測(cè)量反應(yīng)液的吸光度（Absorbance, A）。

5. 濃度計(jì)算： 將測(cè)得的樣本吸光度值與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)磷溶液在相同條件下反應(yīng)測(cè)得的吸光度值（繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)）進(jìn)行比較。依據(jù)朗伯-比爾定律（Lambert-Beer Law），吸光度與溶液中磷的濃度在一定范圍內(nèi)呈線(xiàn)性正比關(guān)系，從而可精確計(jì)算出血清（或血漿）中無(wú)機(jī)磷的實(shí)際濃度（通常報(bào)告單位為 mmol/L 或 mg/dL）。