要保持泵的良好操作性能,必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾和脫氣.下面列出預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施:
1).用高質(zhì)量試劑和HPLC級(jí)溶劑；
2）、過(guò)濾流動(dòng)相和溶劑；
3）、脫氣；
4）、每天開(kāi)始使用時(shí)放空排氣，工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液；
5）、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中；
6）、定期更換墊圈；
7）、需要時(shí)加潤(rùn)滑油；
8）、查閱有關(guān)泵操作手冊(cè)中的其它建議。
處于良好操作狀態(tài)的泵，應(yīng)該能使色譜圖上的基線(xiàn)平穩(wěn)；保留時(shí)間的重復(fù)性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動(dòng)小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。
為了使故障發(fā)生后盡快排除，平時(shí)應(yīng)常備密封、單向閥（入口與出口）、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等部件，以及更換工具。

秘訣1：由強(qiáng)到弱： 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試 驗(yàn)， 這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
秘訣2 三倍規(guī)則 ：每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個(gè)聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過(guò)程中，注意觀(guān)察各個(gè)峰的分離情況。
秘訣3 粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：當(dāng)分離達(dá)到一定程度，應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。