在ELISA試劑盒的使用過程中常見問題有很多如， 加樣器不確；尤其10ul以下的加樣器，對結果影響極大；  保溫設備不良；  洗滌用水不規范。

如何解決這些問題呢：

1在使用過程校正加樣器；10ul以下加樣器采用進口產品（芬蘭、法國等）；

 2 仔細校正溫度到37℃，水浴箱為佳；  

3 必須使用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、礦泉水等； 

4 認真閱讀使用說明書。  

樣品加樣：  

1 加樣不準確；  2 沒有混勻。  加樣時一定要仔細。加樣后，再檢查，以防漏加、錯加。  

2 加樣后，反復抽吸3次混勻，防止血清聚集孔底，導致非特異性吸附。  洗滌  洗滌不*  ①每次注水洗滌，應靜止30秒鐘；②選用吸水紙作為襯墊，每次洗滌后扣干孔內水分；

3 可選用塑料洗滌瓶。  加酶反應 漏加 滴加后，認真檢查各孔  結果判斷  ①包括陰性對照孔在內，各孔顯色普遍偏深；②包括陽性對照在內，各孔均無顯色；③陽性對照不顯色，而其它樣本顯色正常；

4 有些標本顯色不深，判斷陽性困難。  ①可能是洗滌不充分；加樣過量；溫育時間過長溫度過高；按說明書重新操作。如無改善， 可與生產廠家聯系；②可能是漏加樣本或酶液；溫育時間過短溫度過低；試劑保存不當活性下降；按說明書重新 操作。如無改善，可與生產廠家聯系；③陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善，可與廠家聯系，索要對照品； ④重新操作。使用酶標儀，測定光吸收度，按P/N值標準判斷。  ELISA試劑盒保存 保存不規范 一定要在2-8℃存放。不得過高，也不得凍存（凍存后，酶液將失效）。  對照品 對照品為凍干品 按對照管標示，加入相應體積的去離子水或蒸餾水復溶，充分溶解混勻。可按說明書使用。

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