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液相色譜分析樣品的溶解度選擇
閱讀：1164 發(fā)布時間：2016-2-3
通常進(jìn)行液相色譜分析是優(yōu)先考慮的是樣品不必進(jìn)行預(yù)處理，就可經(jīng)溶樣來進(jìn)行分析，因此樣品在有機溶劑和水溶液中的相對溶解性是樣品zui重要的性質(zhì)。
由于樣品在有機溶劑中溶解度的大小，初步判斷樣品是非極性化合物還是極性化合物，進(jìn)而推斷用非極性溶解劑戊烷、己烷、庚烷等，還是極性溶解劑二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等來溶解樣品，并通過實驗判斷。
若樣品溶于非極性溶劑，表明樣品為非極性化合物，通常可選用吸附色譜法或正相分配色譜法、正相鍵合色譜法進(jìn)行分析。若樣品溶于極性溶劑或相混溶的極性溶劑，表明樣品為極性化合物，通常可選用反相分配色譜法或更為廣泛應(yīng)用的反相鍵合相色譜法進(jìn)行分析。
若樣品溶于水相，可首先檢查水溶液的pH值，若呈中性為非離子型組分，常可用反相（或正相）鍵合色譜法進(jìn)行分析。若pH值呈弱酸性，可采用抑制樣品電離的方法，在流動相中加入硫酸、磷酸調(diào)節(jié)pH=2~3，再用反相鍵合相色譜法進(jìn)行分析。若pH值呈弱堿性，則可向流動相中加入陽離子型反離子，再用離子對色譜法進(jìn)行分析。若pH呈強酸性或強堿性，則可用離子色譜法進(jìn)行分析。對呈強離子型水溶性生物大分子的分析仍是液相色譜的特殊難題之一，近年隨凝膠過濾色譜和親和色譜的迅速發(fā)展，對解決像蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的分析提供了有效的途徑。