FITC(Fluorescein Isothiocyanate,異硫氰酸熒光素)是一種綠色熒光團,在免疫學實驗里,經常被用于熒光團標記到相應的檢測分子,如抗體上。FITC的純品為黃色或橙黃色結晶粉末,易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389.4,zui大吸收光波長為 490~495nm,zui大發射光波長為520~530nm,呈現明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是目前應用zui廣泛的熒光素。由于FITC是小分子化合物,每一個抗體可標記幾個FITC分子,IgM通常用小分子的熒光素標記,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。
我們知道,FITC的綠色熒光強度肉眼觀察已經很亮了,但是從上面的圖可見,與Cy2相比還是偏弱,而DyLight 488則更勝*。DyLight是一種新型的熒光分子,與傳統的熒光團如FITC、Rhodamine、Texas Red等相比,具有更強的熒光強度、更高的光學穩定性以及特異性等。同時,DyLight種類齊全,如Dylight 405就是藍色熒光,Dylight 488是綠色熒光,可*替代FITC;*替代Cy3和Rhodamin的Dylight 549;替代Texas Red的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649則是更強的紅色熒光;另外,Dylight還有適配Odyssey系統的近紅外和遠紅外二抗,分別是Dylight 680和DyLight 800。
FITC本身性質穩定,能與蛋白質結合,是檢測組織細胞內蛋白質zui常用的熒光探針。它還能標記抗體,可用于免疫組織化學單染或多重染色。FITC熒光二抗主要優點是人眼對黃綠色較為敏感,通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。缺點是在光照下 易淬滅,易受自發熒光影響。實際上,FITC的zui大缺點是淬滅快,因此要和抗淬滅劑一起使用。DyLight 488則*不一樣,如右圖所示,不同熒光團在含有抗淬滅劑(90%甘油的PBS)里的熒光淬滅情況,由圖可見。FITC的淬滅zui快,Cy2其次,而Dylight 488和Alexa 488都具有很好的光穩定性。因此DyLigt非常適合熒光拍照。那么Dylight到底是一種什么樣的熒光團?不管在結構以及功能和應用上,Dylight都是一種新的熒光團,與傳統的熒光團相比,其分子量相對較小, 因此一個大分子上可以標記更多的Dylight,同時單個的Dylight熒光團,其熒光強度更強,特異性更好;Dylight對光更穩定,這意味著其具 有更高的抗淬滅性,不像FITC因為快速發生淬滅而無法及時捕捉到熒光圖像。
可能還需要考慮的一個問題是價格的問題,其實Dylight的熒光二抗與常規熒光二抗相比,具有更高的性價比,一般來說,Dylight的價格比常規二抗 只高50%左右,但是Dylight的效價通常是常規熒光二抗的2-4倍左右,因此就zui終的性價比,Dylight更勝*。舉例來說,EarthOx的 FITC標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210),100μl和500μl報價分別是¥160和¥640;而相應的EarthOx的 Dylight 488標記的山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210),100μl和500μl報價分別是¥240和¥960,但是在具體使用時,比如免疫熒光實 驗,其推薦稀釋比率分別為1:100和1:400,即100μl和500μl的FITC標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E031210)zui終使用液是 10ml和50ml,而100μl和500μl的Dylight 488標記山羊抗小鼠IgG二抗(貨號為E032210)zui終使用液是40ml和200ml,可見,即使不考慮Dylight更高的熒光強度、更好的光學 穩定性和特異性,但就價格來說,Dylight熒光二抗也具有更高的性價比。下圖為EarthOx*DyLight 488標記,針對不同種屬的二抗產品,艾美捷均提供現貨包裝:
中英文品名 | 品牌 | 貨號 | 規格 | 詳情 |
DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) | EarthOx | E032210 | ¥240/100μl ¥960/500μl | 詳情 |
DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) | EarthOx | E032220 | ¥240/100μl ¥960/500μl | 詳情 |
DyLight 488 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) | EarthOx | E032230 | ¥240/100μl ¥960/500μl | 詳情 |
DyLight 488 AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) | EarthOx | E032240 | ¥240/100μl ¥960/500μl | 詳情 |
作為多家的中國或區域代理,艾美捷能為您提供全系列的Dylight*熒光二抗,包括Jackson、KPL的大包裝粉末形式的 Dylight熒光二抗,另外,也提供EarthOx的小包裝液體形式Dylight熒光二抗,均具有很高的性價比。針對熒光標記二抗,有FITC、 TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多種熒光標記二抗;按照檢測物種分,有抗 人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉鼠、狗、牛,以及多種細菌類二抗;另外,還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、 IgG(ab’)2等不同類型抗體。如果您對上述產品感興趣,請隨時與艾美捷。
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