小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒

Mouse TAFI ELISA Kit

特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

有效期： 6 個月

預期應用： ELISA 法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。

說明

1 ．試劑盒保存： -20 ℃（較長時間不用時）； 2-8 ℃（頻繁使用時）。

2 ．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。

3 ．中、英文說明書可能會有不一致之處，請以英文說明書為準。

4 ．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、 HRP 標記的親和素，經過*洗滌后用底物 TMB 顯色。 TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（ OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.          酶聯板（ Assay plate  ）：一塊（ 96 孔）。

2.          標準品（ Standard ）： 2 瓶（凍干品）。

3.          樣品稀釋液（ Sample Diluent ）： 1 × 20ml/ 瓶。

4.          生物素標記抗體稀釋液（ Biotin-antibody Diluent ）： 1 × 10ml/ 瓶。

5.          辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （ HRP-avidin Diluent ）： 1 × 10ml/ 瓶。

6.          生物素標記抗體（ Biotin-antibody ）： 1 × 120 μ l/ 瓶（ 1 ： 100 ）

7.          辣根過氧化物酶標記親和素（ HRP-avidin ）： 1 × 120 μ l/ 瓶（ 1 ： 100 ）

8.          底物溶液（ TMB Substrate ）： 1 × 10ml/ 瓶。

9.          濃洗滌液（ Wash Buffer ）： 1 × 20ml/ 瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋 25 倍。

10.      終止液（ Stop Solution ）： 1 × 10ml/ 瓶（ 2N H 2 SO4 ）

人細菌性陰道病（BV）Elisa試劑盒 實驗操作步驟
實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣：分別設空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔加待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液
100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃，60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見孔內有明顯藍色，即可終止）。
5. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。