人肝癌亞力山大細胞PLC/PRF/5 細胞培養步驟說明書

一、細胞名稱：PLC/PRF/5

二、二、中文名稱：人肝癌亞力山大細胞

三、生長特性：  □ 貼壁     □ 懸浮       □ 半懸浮半貼壁

四、PLC/PRF/5 (人肝癌亞力山大細胞)生長條件：

五、組成：

六、人肝癌亞力山大細胞PLC/PRF/5 細胞培養步驟與注意事項

1. 細胞收到后建議在培養箱穩定4小時左右再依據細胞密度，換液培養或傳代。

2. 如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態，請將懸浮的細胞及時離心，加15%血清的*培養基到新的培養皿/瓶中繼續培養3天；同時原培養瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養基，培養2-3天。若3天后細胞都沒有出現增殖而是繼續脫落死亡，請及時聯系實驗室，技術人員會跟進解決。

3. 貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不超過20%），或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養瓶繼續培養。

4. 生長不均：貼壁細胞若出現生長不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重新打散細胞，加入新鮮培養基進行培養。

七、PLC/PRF/5 (人肝癌亞力山大細胞)常規培養傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）

1. 吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）。

2. 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁運動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。

3. 取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養。

4. 注意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

PLC/PRF/5 (人肝癌亞力山大細胞)特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養，建議添加雙抗培養）

1. 收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養基，切勿使用原瓶中運輸用培養基。

2. 如簽收時出現培養瓶壁破裂，漏液等情況請及時拍照并聯系實驗室。

3. 細胞任何售后問題，均需拍照存檔并及時聯系客服。PH-pc-r034    肝動脈平滑肌細胞    Hepatic artery smooth musclecells    形態：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣    培養條件：MEM/F12 +10% FBS