(HuH-7細胞)人肝癌細胞分化的特點主要可以概括成三點：

① 持久性:細胞分化貫穿于生物體整個生命進程中,在胚胎期達到*程度

② 穩(wěn)定性和不可逆性:一般來說,分化了的細胞將一直保持分化后的狀態(tài),直到死亡

③ 普遍性:生物界普遍存在,是生物個體發(fā)育的基礎

(HuH-7細胞)人肝癌細胞

培養(yǎng)條件

DMEM-H10%FBS

細胞生長：貼壁生長

細胞形態(tài)：上皮樣

細胞數量：1×106個細胞數

細胞傳代：1：2傳代消化3-5分鐘3天內可長滿

細胞特性：據說產甲胎蛋白胰酶α抗體血漿銅藍蛋白纖維蛋白原纖維粘連蛋白等

細胞純度：92％

細胞活力：89％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

HuH-7細胞|人肝癌細胞HuH-7 培養(yǎng)方法

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

細胞凍存：液氮凍存（基礎培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）

細胞運輸：干冰運輸（1Vial）或活細胞運輸（T-25flasks）

細胞用途：只可用于科研不可用于臨床診斷和治療

培養(yǎng)方法

傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約5min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

生長特性 高密度時，細胞連城一片，細胞之間間隙不明顯

存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜移至液氮中保存

(HuH-7細胞)人肝癌細胞可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，來自sciencell、ICLC、ATCC等細胞庫。從胚胎提取，于原代（或二代）凍存在液氮中，一律采用干冰運輸。客戶收到細胞后，從干冰中取出放入液氮中保存，待實驗安排好后，解凍后即可以進行復蘇培養(yǎng)。

生長特性： 貼壁生長

細胞來源： 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進

培養(yǎng)條件： 培養(yǎng)基：1640 +10%FBS（推薦德國BI 04-002-1A

優(yōu)等胎牛血清）

氣相：空氣95%，二氧化碳5%

溫度：37℃

培養(yǎng)： 一、貼壁細胞

1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代；

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶，置于37°孵育消化（di一次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間，記錄*消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后收集細胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。

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(HuH-7細胞)人肝癌細胞是生物體結構和功能的基本單位。