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PC-3細胞|人前列腺癌細胞PC-3 培養方法步驟

來源:上海琛藝實業有限公司   2019年12月25日 14:30  

細胞名稱   人前列腺癌細胞;PC-3[PC3]說明書

形態特性 上皮細胞樣

貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長,并可懸浮生長 

特征特性 PC-3源于一位62歲白人男性IV級前列腺腺癌患者的骨轉移灶;有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-睪酮還原酶活性。

培養條件 F12K 10%FBS 

傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代  傳代情況 C23

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 STR

同工酶 同工酶鑒定染色體

 

庫存狀態:現貨

 

細胞規格:株

質控標準:無支原體、無污染、符合標準

運輸方式:新鮮運輸和凍存管運輸

貨期:新鮮運輸需要1-2周,凍存管運輸的需要2-3天

本公司生產的人前列腺癌細胞;PC-3[PC3]說明書采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

PC-3細胞|人前列腺癌細胞PC-3 培養方法步驟培養:

1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內,固定在泡沫板上。

2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養皿中。

3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,并剔除多余無用的組織。

4.將篩網置于平皿中,脾臟置于篩網上,用彎頭鑷鑷住,輕輕在篩網上進行碾磨,同時不停滴加不含血清的培養液沖洗。

5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中,離心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。

6.加入10ml培養液,吹打混勻,取樣計數。

7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養瓶中,輕輕搖晃混勻,在培養瓶上。

PC-3(人前列腺癌細胞)細胞培養的優點:

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 

適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

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