LLC小鼠肺癌細胞 LLC(小鼠肺癌細胞)

【細胞貨號】 C0775

【細胞縮寫】 LLC細胞

【細胞名稱】LLC細胞|小鼠肺癌細胞LLC 培養(yǎng)說明書

【背景資料】 小鼠Lewis肺癌細胞

【細胞來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、LLC小鼠肺癌細胞promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內外*大學建系

【代次】 P4

【規(guī)格】 復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）

【細胞數(shù)】 1*10（6）

【生物安全級別】 1

【生物體】 小鼠

【組織來源】 肺

【細胞形態(tài)】 其它形式

【細胞特性】 貼壁

【細胞活力】 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

【細胞檢測】 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

【培養(yǎng)條件】 詳見細胞說明書

【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次

【凍存條件】 詳見細胞說明書

【主要文獻】 請具體查閱相關發(fā)表文章

接收后的操作流程與注意事項：

1、如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決

2、貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度（*高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

3、生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，LLC小鼠肺癌細胞可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）

1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）

2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6-8ml*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散

3、取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存

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