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HPLC分析，尤其是正相色譜的分析受溫度的影響特別大，反相分析一般受影響不大，有些物質(zhì)的分析必須在固定的溫度下進(jìn)行。之前用鈣柱做過葡萄糖的分析，要求必須柱溫85度。
而在色譜定性方法中，柱溫變化對定性結(jié)果的影響如下：
①當(dāng)采用絕對保留值定性時(shí)，其他色譜條件不變，柱溫變化時(shí)，保留時(shí)間就會發(fā)生變化，這樣就直接影響定性結(jié)果判斷。
②當(dāng)采用相對保留值α定性時(shí)，α只是柱溫和固定液的函數(shù)，只與待測組分的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)，消除了外界因素的影響，因此跟柱溫變化關(guān)系不大，但是柱溫變化影響判斷結(jié)果。
③當(dāng)采用保留指數(shù)定性時(shí)，恒溫分析，保留指數(shù)與保留時(shí)間有關(guān)，而柱溫影響保留時(shí)間變化；程序升溫分析，除了保留時(shí)間，保留指數(shù)還與保留溫度有關(guān)。因此，這種定性方法易受柱溫變化影響。
④當(dāng)采用純樣疊加法定性時(shí)，已知混合物中含某組分，將該組分的純樣加入，觀察加入前后的響應(yīng)信號變化。柱溫變化，保留時(shí)間變化，但是加入前后的樣品影響信號變化是一致的，因此柱溫變化不影響采用這種方法定性的結(jié)果。
而在定量計(jì)算時(shí)，經(jīng)常要用到校正因子，如重量校正因子，和組分的質(zhì)量以及響應(yīng)信號有關(guān)。柱溫變化，峰高變化，峰面積不變，因此，在柱溫變化不影響峰形正常的前提下，以峰高為響應(yīng)信號的重量校正因子，受柱溫影響，而以峰面積為響應(yīng)信號的重量校正因子將不受影響。常見定量方法中，在柱溫波動不影響出峰效果的前提下，對定量結(jié)果的影響如下：
①采用歸一化法時(shí)，定量時(shí)需要各組分的校正因子，當(dāng)以峰面積為響應(yīng)信號時(shí)，定量結(jié)果不受影響，以峰高為響應(yīng)信號則受影響。
②采用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，需要計(jì)算定量校正因子，影響規(guī)律和①同。
③采用外標(biāo)法時(shí)，即標(biāo)準(zhǔn)曲線法，當(dāng)以峰面積為響應(yīng)信號時(shí)，不受影響，但是當(dāng)以峰高為響應(yīng)信號時(shí)，影響很大。
總之，柱溫變化可能會導(dǎo)致定性、定量分析結(jié)果的變化。
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