培養基瓊脂粉一般為白色、淡黃色或淡灰色粉末狀,在冷水中不溶解,加熱煮沸或高壓滅菌可使瓊脂溶解,冷卻后可凝成固態,反復加熱和冷卻雖然可以使瓊脂在液態和固態多次轉換,但瓊脂的凝膠強度會越來越低。外觀白而沒有光澤,雜質含量高,透明度很差(濃度的水溶液溶解后,可發現大量的水中不溶物)。如果用冷水或溫水浸泡30分鐘左右,它很快就吸水膨脹復原,而真瓊脂沒有這種現象。
培養基瓊脂粉的使用注意事項:
1、溶解干粉時,建議水溫在40℃以下,最高不超過60℃。瓊脂在遇到熱水時,表面易吸水變硬,結成硬塊,不利于分散溶解。因此在進行干粉溶解時,宜用冷水,并不停攪拌至分散均勻無團塊,再進行加熱處理;
2、滅菌前需進行加熱煮沸使瓊脂*溶解,分散均勻,方可進行分裝試管或錐形瓶,否則分裝后可能出現瓊脂分布不均,凝固性不一;滅菌前的加熱煮沸溶解同時有助于加快高壓滅菌過程的熱穿透,提高滅菌效果,降低滅菌失敗的幾率;
3、已凝固的培養基不可以再次高溫高壓滅菌。若培養基內成分較穩定,可重新沸水浴溶化一次使用;
4、需添加抗生素或其他不穩定成分的培養基,需在臨用前,待培養基冷卻至50-55℃時加入,過早或過熱時加入這些成分,易導致不穩定成分分解,降低培養基使用效果;
5、已凝固的培養基不可反復多次加熱溶化使用。反復加熱易使培養基內營養成分分解,瓊脂的凝膠強度下降,一般成分較穩定的培養基允許溶化一次使用。
6、已凝固的培養基,不可在結冰條件下保存。培養基結冰會使瓊脂內部結構破壞,導致失水或凝固性變差,瓊脂變性。
培養基瓊脂粉不凝固的因素:
1、培養基PH值過低,偏酸,水解。
2、所加瓊脂量不夠,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒有充分搖勻,凝固不均勻。
3、瓊脂質量不過關,瓊脂條在使用時添加量要稍微高一點,瓊脂粉是不是新買的。
4、滅菌溫度過高,加熱時間過長。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度。
5、培養基沒有加熱溶解夠不夠,就沒有凝固。是不是瓊脂加錯了,營養瓊脂不會凝固。
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