使用前檢查各處閥門、壓力表有無松動情況，保證閥門處于關閉狀態，接下來即可進行抽真空和充氣操作，真空手套箱分主箱體和過渡艙兩部分，主箱體和過渡艙均可單獨抽真空。

抽真空與充氣的步驟：

1、打開過渡艙內門，關閉過渡艙外門，將手套口壓蓋蓋緊，打開手套口之間的三通閥，將手套接口壓蓋與手套之間的空間接通箱體，使得抽氣時手套內外（箱體和接口）同時抽真空，保持兩邊氣壓平衡。

2、將真空泵接到過渡室一個閥門上，開啟真空泵，緩緩打開此閥門（如打開閥門的速度太快，可能引起手套膨脹），對系統進行抽氣。

3、待真空表指針下降并穩定在合適的真空度時，抽真空完成，此時應先關閥門再關真空泵。

4、然后通過另一閥門向箱體內充入惰性氣體，直至氣壓比大氣壓（氣壓表指數為0MPa）略高一點，使箱體內、外的壓力基本平衡，且內部略高于外部，可保證大氣不會滲入箱體內部（如果您想使箱體內的氣體更純凈，最好將以上抽氣和充氣過程重復幾次）。關掉連接手套接口的三通閥，打開手套接口上的壓蓋，就可以進行操作了。 

將物件放入與取出主箱體的方法：

1、將物件放入主箱體的方法：當實驗室操作人員完成“抽真空與充氣”的操作后，如需要放物件放入主箱體，請先將過渡室的內門關上，打開過渡室的外門，將物件放入，然后關上外門，利用過渡室上的二個閥門進行抽氣和充氣。務必使主箱體和過渡室內的壓力與大氣壓基本平衡，才能打開里面的門，將物件放入主箱體。

2、將主箱體內物件取出的方法：先將物件放入過渡室，關緊過渡室內門。如過渡室內氣壓與大氣壓基本平衡，即可打開過渡室外門將物件取出。

操作注意事項：

1、不管打開內門還是外門，都必須保證門兩邊的氣壓基本平衡，否則，要么打不開，要么發生“氣爆”現象。同樣，在對箱體內抽氣與充氣時，也必須保證三通閥處于打開狀態（即保證手套內外的氣壓相等），否則，手套會膨脹爆裂。

2、如箱體出現漏氣，應首先檢查過渡室門是否關緊和手套口是否破損。如還有漏氣請檢查真空表座、閥門及兩個門上的“O”型圈及其它密封是否完好。過渡室門與手套口門上的“O”型圈要定期更換。

3、對系統抽氣時，請緩緩打開閥門，并隨時注意手套的變化，如出現膨脹，應減慢抽氣速度，如仍不能解決問題，應停止抽氣，如手套發生爆裂，檢查三通閥是否打開。