簡述核酸電泳技術(shù)的分類和基礎(chǔ)原理

來源：北京東南儀誠實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司 2022年07月22日 09:17

核酸電泳技術(shù)是生物化學(xué)中廣泛的一種技術(shù)，是指使用電流來操縱蛋白質(zhì)分子以用于一系列生物醫(yī)學(xué)研究、診斷和制造目的實(shí)驗(yàn)的過程。

目前核酸電泳技術(shù)分為以下4種：凝膠電泳、醋酸纖維素薄膜電泳、等電聚焦電泳、毛細(xì)管電泳。

1.凝膠電泳

凝膠電泳是常用的一種蛋白表達(dá)分析技術(shù)。

技術(shù)原理是根據(jù)檢體中蛋白質(zhì)分子量大小的不同，使其在電泳膠中分離。在大腸桿菌表達(dá)純化外源蛋白的實(shí)驗(yàn)中，SDS-PAGE更是較常用的操作。

技術(shù)應(yīng)用是檢測蛋白的表達(dá)情況（表達(dá)量，表達(dá)分布），以及分析目的蛋白的純度等。聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）用于分離蛋白質(zhì)較小分子核酸。瓊脂糖凝膠電泳適用于分離同工酶及其亞型、大分子核酸等。

2.醋酸纖維素薄膜電泳

醋酸纖維薄膜電泳操作簡單、快速、廉價(jià)。

技術(shù)原理以醋酸纖維薄膜為支持物，由纖維素的羥基經(jīng)乙酰化而制成。這種薄膜對蛋白質(zhì)吸附小，能消除電泳中出現(xiàn)的“托尾”現(xiàn)象，具有分離速度快、樣品用量小的特點(diǎn)，適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。

技術(shù)應(yīng)用于血清蛋白、血紅蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、類固醇激素及同工酶等的分離分析中，盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電泳低，但它具有簡單、快速等優(yōu)點(diǎn)。

3.等電聚焦電泳

等電聚焦電泳是在電場中分離蛋白質(zhì)技術(shù)的一個(gè)重要發(fā)展。

技術(shù)原理是在穩(wěn)定的pH梯度中按等電點(diǎn)的不同來分離兩性大分子。

技術(shù)應(yīng)用于分離分子量相近而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)組分，在區(qū)帶電泳中分辨率最好。常用的pH梯度支持介質(zhì)有聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠、葡聚糖凝膠等。

4.毛細(xì)管電泳

毛細(xì)管電泳又稱高效毛細(xì)管電泳。

技術(shù)原理是以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力的將液相分離，是一種利用電泳和電滲流的電動力學(xué)原理，在一種空芯的微小內(nèi)徑的毛細(xì)管中進(jìn)行混合物的高效分離技術(shù)。

毛細(xì)管電泳分類為：毛細(xì)管自由溶液區(qū)帶電泳、毛細(xì)管凝膠電泳、毛細(xì)管等電聚焦電泳及膠束毛細(xì)管電動力學(xué)色譜。

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