一、小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）介紹

1.基本信息：

通用名：小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）
英文名稱：Anti-MHV Ab （ELISA）
包裝規格：48T/盒、96T/盒
預期用途：用于定性檢測小鼠血清樣本中的肝炎病毒IgG抗體。

2.檢驗原理：

本試劑盒采用間接法原理定性檢測小鼠血清樣本中的肝炎病毒抗體IgG(MHV IgG)。以小鼠肝炎病毒抗原包被酶標板，待檢小鼠血清中的肝炎病毒抗體與包被抗原反應，洗滌除去未結合的抗體，再與酶標記的抗小鼠IgG抗體結合，形成抗原-抗體-酶標抗體復合物，洗滌除去未結合的酶標記物，再加入底物TMB顯色，終止液終止反應后，用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值），待測樣品的濃度與OD值成正比關系，并通過與CUTOFF值相比較，從而診斷受檢小鼠是否感染肝炎病毒。

主要組成成分

3、適用儀器：各類國產或進口酶標儀均可使用，檢測波長450nm，參比波長620/630nm。

4、儲存條件及有效期：

• 試劑禁止冷凍，避免陽光直射，在2℃～8℃儲存條件下，未開封試劑有效期為12個月。

• 試劑盒開封后，未使用完的試劑保存在2℃～8℃，3個月內試劑盒性能可保持穩定。

• 試劑盒生產日期和效期見試劑盒外包裝。

5、樣本收集、處理及保存方法

• 血清：采集適量小鼠血液于1.5mL離心管中，室溫靜置30～60min，3000 rpm 離心10min，收集血清樣本以備后用（建議采用取血方法，獲得的血清更為清亮）；

• 保存：樣本收集后短時間（3天內）可保存于2～8℃，如需長期保存，可分小體積凍存于-20℃一下，避免反復凍融；

• 用于檢測的樣本應澄清透明，避免使用溶血樣本，若有懸浮物應離心去除。

6、檢驗方法

測試前的準備：

• 在進行測試前請先完整閱讀使用說明書，并嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

• 試劑盒保存在2～8℃，使用前室溫平衡20分鐘，從冰箱取出的濃縮清洗緩沖液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶溶解后再使用。

• 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

• 所有液體組分使用前充分搖勻。

• 預處理后的樣本請按照操作步驟用樣本稀釋液適當稀釋以達到試劑盒的 檢測效果。

• 清洗緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：9稀釋，即1份的清洗緩沖液加9份的蒸餾水。

• 將恒溫箱溫度調整至37℃，待溫度穩定后使用。

操作步驟：

• 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用鋁箔袋密封放回4℃；

• 設置陰、陽性對照孔（100μL/孔，即用型）各1孔，空白對照1孔（雙波長檢測可不設置空白對照孔）；

• 待測樣本稀釋：將樣本用樣本稀釋液按照1：100的比例稀釋，（如：將待測血清按序排列在試管架上，在深孔板內加入樣本稀釋液300μL/孔，再加待測樣本3μL，震蕩10s，）取100μL加入樣本孔，用封板膜封板膜/自封袋封住反應孔，37℃孵育30min；

• 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加300μL洗滌液，靜置30～60s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

• 隨后每孔加入小鼠酶結合物100μL，空白孔除外，用封板膜/自封袋封住反應孔，37℃孵育30min。

• 重復步驟4)

• 每孔加入底物100μL，37℃避光孵育15min。

• 每孔加入終止液50μL，立即測試結果。

• 以空白孔調零，用酶標儀450nm單波長測定各孔OD值，或直接采用450nm-620/630nm雙波長測定各孔的OD值（加入終止液15min內讀取）。（推薦使用雙波長檢測）
  

7、陽性判斷值

• 陽性符合率：用10份企業陽性參考品檢測，結果不得出現假陰性；

• 陰性符合率：用10份企業陰性參考品檢測，結果不得出現假陽性；

• 特異性：測試小鼠鼠痘病毒、小鼠病毒、小鼠呼腸孤病毒III型、小鼠細小病毒、小鼠仙臺病毒陽性血清無交叉反應；

• 重復性：批間差及批內差均均≤15%。

二、小鼠肝炎病毒ELISA抗體檢測試劑盒（酶聯免疫法）優勢

1、與競品比較

2、產品圖片

3、試劑盒的性能