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elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)普及，絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多，ELISA試劑盒不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利，往往還更加。現(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國(guó)產(chǎn)也有進(jìn)口，數(shù)量繁多令人目不暇接，怎樣才能選出適用的產(chǎn)品呢?
首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測(cè)的分子進(jìn)行檢測(cè)，除此以外也還有一些需要加以考量的因素。
首先明確檢測(cè)何種蛋白。
第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性較好。
第三步、尋找檢測(cè)這些物種蛋白的試劑盒。
第四步、咨詢商家ELISA是試劑盒使用的抗體類(lèi)型：多抗還是單抗？單抗是針對(duì)什么抗原決定簇的？
第五步、做出自己的判斷該買(mǎi)哪個(gè)試劑盒。
ELISA試劑盒有多種類(lèi)型，不過(guò)它們都有一個(gè)共同特點(diǎn)，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)ELISPOT是兩種特殊的類(lèi)型，In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè)。ELISPOT有點(diǎn)像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原形成斑點(diǎn)。此外，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)。
通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過(guò)有時(shí)候雙抗夾心法并不是選擇，例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著，又或者抗體只有一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下，競(jìng)爭(zhēng)性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無(wú)標(biāo)記的抗原進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，以結(jié)合捕獲抗體。
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