一、熒光分析法的基本原理    
    處于基態的被測物質的分子在吸收適當能量，如光、化學、物理能后，其共價電子從成鍵分子軌道或非鍵分子軌道躍遷到反鍵分子軌道上去，形成分子激發態。分子激發態不穩定，將很快衰變到基態。在分子激發態返回到基態的同時常伴隨著光子的輻射。這種現象就是發光現象。熒光則屬于分子的光致發光現象。

二、熒光分光光度計的特點
   用熒光分析法分析的儀器，稱熒光分光光度計（熒光分析儀）。
    熒光分析法具有靈敏度高（比紫外、可見分光光度法高2~3個數量級），能提供激發光譜、發射光譜、發射強度、特征峰值等信息，在生物、環保、醫學、藥物、石油勘探等諸多領域都有廣泛的應用。本儀器不僅能直接、間接地分析眾多的有機化合物；另外，還可利用有機試劑間的反應，進行近70種無機元素的熒光分析。熒光的光譜特征是熒光光譜總是滯后于激發光譜即斯托克斯位移.

三、熒光強度與物質濃度的關系
1．對于某種熒光物質的稀溶液，在一定強度的激發光照射下，熒光物質的發射強度與入射光的強度以及檢測器的放大倍數成正比，可以用以下公式表示：
          F=KIFC
          K-----與儀器系統有關的常數
          I-----入射光的強度
          F-----熒光物質的熒光效率
          C-----熒光物質的濃度
2．當樣品濃度增大到一定值時，熒光強度與濃度就不成線性關系。
    原因一：樣品濃度較高時，液池前部的溶液強吸收則發生強的熒光，液池后半部的溶液不易受到入射光照，不發生熒光，所以熒光強度反而降低。
    原因二：在濃度較高的溶液中，可能發生溶液溶質與溶質間的相互作用，形成一種不致熒光的復合物，從而造成熒光強度反而降低的現象。