手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
Celetrix電轉幾乎不挑細胞種類，都可以達到高效率。有一部分細胞種類，由于其本身具有的性質，在電轉時需要特別注意采用合適的方案。
單核細胞和巨噬細胞相關的細胞系，有些電轉質粒后細胞會在兩三天內幾乎全部死亡。THP-1，U937，HL-60和Molm13等細胞電轉質粒后會死亡。其他老式的電轉儀電轉質粒到這些細胞后會有部分細胞存活，是因為其中有很多沒有電轉成功的細胞活下來了，對于電轉沒有什么意義。
Celetrix專門開發了試劑盒可以幫助單核細胞類的細胞系進行質粒電轉，目前驗證過THP-1和U937細胞轉入質粒后部分細胞可以存活生長，從而使難做的細胞株穩轉變得很簡單。下圖所示THP-1細胞電轉Cas9-gRNA-Puro-GFP質粒時僅用1x10E6細胞就可以篩選得到穩轉克隆并且成功進行基因編輯。
THP-1這些細胞電轉mRNA, siRNA和 Cas9 RNP沒有細胞死亡的問題。如果可以不使用質粒，電轉非常容易，效率接近100%并且細胞存活非常好。
我們的THP-1試劑盒對于Molm13和SUP-M2細胞的質粒電轉幫助不大，我們在繼續研究其質粒電轉方法。
小鼠的原代骨髓分離的單核細胞和造血干細胞非常特殊，不僅電轉質粒后容易死亡，也會迅速降解mRNA和siRNA造成電轉不成功的假象。只要電轉液和mRNA和這些細胞接觸1分鐘，再轉移到其他細胞上電轉就會發現mRNA已經完全降解。小鼠脾臟細胞也有降解mRNA和siRNA的特性。而小鼠腹腔的巨噬細胞雖然電轉質粒后容易死亡，電轉mRNA卻沒有降解問題可以使實驗順利進行。
電轉實驗中碰到特殊現象時，用戶可以發郵件向我們咨詢，我們可以提供其他實驗方案供選擇。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心