手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
AGS細胞常見問題及處理策略
AGS細胞（人胃腺癌細胞）在培養過程中易出現貼壁性差、污染及異常增殖等問題，需針對性優化操作流程與環境控制，以保障細胞正常生長與實驗可靠性。
一、貼壁性差：優化培養條件與操作細節
培養基與血清適配性
確認使用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM或RPMI-1640培養基，血清需經56℃滅活30分鐘以去除補體干擾。若細胞仍貼壁不佳，可嘗試添加0.1%ECM膠（如Matrigel）預涂培養瓶，增強細胞黏附。
避免頻繁更換血清品牌，防止因成分差異導致細胞適應不良。
傳代操作規范
消化時使用0.25%胰酶-EDTA，37℃孵育1-2分鐘，待細胞變圓后立即終止消化（加入2倍體積培養基），避免過度消化損傷細胞膜。
傳代密度控制在1:3至1:4，過低密度（如<1:6）易導致細胞接觸抑制失效，貼壁能力下降。
培養環境穩定
維持37℃、5%CO?、飽和濕度條件，避免溫度波動（如頻繁開關培養箱）或氣體濃度異常（如CO?濃度>6%）影響細胞代謝。
二、污染：嚴格無菌操作與早期干預
細菌/真菌污染
觀察培養基渾濁度、pH變化（黃色變紫）及細胞形態（如顆粒增多、崩解），若懷疑污染，立即丟棄細胞并底消毒超凈臺（75%酒精擦拭+紫外線照射30分鐘）。
培養基中添加1%雙抗（青霉素-鏈霉素）作為預防，但長期使用可能篩選耐藥菌，建議僅在污染高發期使用。
支原體污染
定期檢測（如PCR法或熒光染色法），若陽性則用5-10μg/mLBM-Cyclin處理2-3周，同時更換所有培養用品（包括培養基、血清、槍頭）。
三、異常增殖：控制傳代周期與密度
過密生長抑制
當細胞融合度達80%-90%時及時傳代，避免接觸抑制失效導致細胞堆疊、形態異常（如多核化）。
若細胞已堆疊，可用0.02%EDTA短暫處理（1-2分鐘）分散細胞團，再重新鋪板。
遺傳漂變干預
每10-15代凍存一支原始細胞株，避免長期培養導致基因型漂移（如增殖速度加快、藥物敏感性改變）。
若細胞出現自發轉化（如形成克隆島、接觸抑制消失），建議更換新復蘇的細胞株。
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心