手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
抗體分析色譜柱是專門用于分離、純化和分析抗體及其相關分子的高效液相色譜柱，在生物制藥、生物技術及科研領域發揮著關鍵作用。其核心原理基于抗體與固定相之間的特異性相互作用（如親和、離子交換、疏水或尺寸排阻），結合流動相的梯度洗脫，實現抗體分子與雜質的高效分離。
其采用高純度、高交聯度的填料基質（如聚苯乙烯二乙烯基苯、硅膠等），確保色譜柱的化學穩定性和耐壓性。同時，通過優化填料粒徑和孔徑分布，提高柱效和分離度，滿足高精度分析需求。此外，部分色譜柱還配備親水涂層或特殊化學鍵合相，減少非特異性吸附，提高抗體回收率。
抗體分析色譜柱的使用需要特別注意操作規范、樣品處理、柱子維護以及實驗條件優化，以確保分析結果的準確性和柱子的使用壽命。以下是關鍵注意事項：
一、操作規范與安全性
避免壓力沖擊
防止突然升高壓力（如泵啟動過快或閥門關閉過緊），可能導致柱床結構破壞。
使用前需緩慢調節流速，尤其是新柱或長時間未使用的柱子。
溫度控制
避免極d溫度（如高溫導致硅膠基質降解或低溫引起凍融損傷）。
SEC柱推薦在室溫下運行，HIC或RPC柱可根據需求調整溫度。
樣品兼容性
確保樣品緩沖液與柱子的pH、離子強度兼容（如HIC柱需高鹽吸附、低鹽洗脫）。
避免樣品中含有顆粒物或不溶性物質，建議預先過濾（0.22μm濾膜）。
二、樣品處理與進樣
樣品預處理
去除樣品中的顆粒、脂質、核酸等雜質（如超濾離心或預柱過濾）。
調節樣品pH和離子強度至柱子適用范圍（如SEC柱需低鹽緩沖液）。
進樣量控制
避免超載（如SEC柱通常進樣量≤10%柱體積，過量可能導致分辨率下降）。
對于高濃度樣品，建議稀釋后進樣，避免柱效降低。
避免氣泡引入
進樣前需徹d排氣，防止氣泡進入柱床導致流路堵塞或壓力波動。
三、柱子維護與保養
清洗與再生
SEC柱：定期用高濃度鹽溶液（如1 M NaCl）沖洗，去除疏松吸附的雜質。
HIC柱：用高鹽緩沖液（如2 M硫酸銨）再生，恢復疏水相互作用能力。
RPC柱：用有機溶劑（如乙腈:水=90:10）沖洗，去除強疏水性殘留物。
存儲條件
長時間不用時，需用保護液（如0.05%NaN?+20%乙腈）封存，防止微生物污染或干燥。
避免冷凍（尤其硅膠基質柱），可冷藏（2-8℃）保存。
反沖禁忌
多數色譜柱禁止反方向沖洗，可能破壞填料結構（如SEC柱的瓊脂糖基質）。
四、實驗條件優化
流速與壓力
控制在柱子推薦流速范圍內（如SEC柱通常為0.5-1 mL/min），過高流速可能導致分辨率下降。
監測壓力變化，異常升高可能提示柱床污染或堵塞。
緩沖液選擇
避免使用強酸性或強堿性緩沖液（如pH<2或pH>10），可能腐蝕填料或破壞鍵合相。
定期更換流動相，防止微生物滋生或成分揮發。
梯度洗脫設計
HIC或RPC柱需優化梯度程序（如鹽濃度或有機溶劑梯度），避免洗脫過快或過慢。
梯度結束后用初始流動相平衡柱子，恢復柱效。
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心