ELISA試劑盒:精準捕捉自身免疫疾病的“幕后黑手”
自身免疫疾病,如同一場人體內部的“誤傷悲劇”——免疫系統這個本該抵御外敵的“忠誠衛士”,錯誤地將自身健康的組織、器官或細胞識別為“入侵者”,并發動猛烈攻擊。這種持續的自我攻擊會導致廣泛的炎癥和組織損傷,引發一系列復雜的慢性疾病,如類風濕關節炎的關節疼痛變形、系統性紅斑狼瘡的多系統損害、1型糖尿病的胰島素生產細胞破壞等。
常見的自身免疫疾病示例:
1. 類風濕關節炎 (Rheumatoid Arthritis, RA):免疫系統主要攻擊關節滑膜,導致關節疼痛、腫脹、僵硬和進行性損傷。核心檢測靶點:類風濕因子 (RF)和 抗瓜氨酸化蛋白抗體 (ACPA/抗CCP抗體)。
2. 系統性紅斑狼瘡 (Systemic Lupus Erythematosus, SLE):可影響皮膚、關節、腎臟、血液系統、神經系統等多個器官。核心檢測靶點:抗核抗體 (ANA)及其特異性抗體譜(如抗dsDNA抗體、抗Sm抗體)。
3. 1型糖尿病 (Type 1 Diabetes Mellitus, T1DM):免疫系統特異性破壞胰腺中產生胰島素的β細胞。核心檢測靶點:抗胰島細胞抗體 (ICA)、抗谷氨酸脫羧酶抗體 (GADA)、抗胰島素抗體 (IAA)、抗酪氨酸磷酸酶樣蛋白抗體 (IA-2A)。
4. 橋本甲狀腺炎 (Hashimoto's Thyroiditis):免疫系統攻擊甲狀腺,導致甲狀腺功能減退。核心檢測靶點:抗甲狀腺過氧化物酶抗體 (TPOAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體 (TgAb)。
5. 乳糜瀉 (Celiac Disease):*對食物中的麩質(存在于小麥、大麥、黑麥中)產生異常免疫反應,損傷小腸絨毛。核心檢測靶點:抗組織轉谷氨酰胺酶抗體 (tTG-IgA)、抗肌內膜抗體 (EMA)。
ELISA試劑盒:如何精準鎖定“自身抗體”?
酶聯免疫吸附試驗 (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA) 是檢測血液等樣本中自身抗體的核心技術,其高靈敏度、特異性及自動化優勢使其成為自身免疫疾病診斷和監測的基石。
ELISA檢測自身抗體的核心原理(以間接法為例):
1. 包被“誘餌”(抗原固定):
* 微孔板(通常是96孔板)的孔壁上預先包被特定的**純化抗原**。這些抗原是免疫系統錯誤攻擊的“目標”分子。
* 例如:檢測RA的試劑盒會包被瓜氨酸化肽段(用于抗CCP抗體);檢測SLE的會包有人源或重組DNA(用于抗dsDNA抗體);檢測乳糜瀉的會包被組織轉谷氨酰胺酶(用于tTG抗體)。
2. 加入“嫌疑樣本”(樣本孵育):
* 將稀釋后的患者血清或血漿樣本加入微孔中。
* 如果樣本中存在針對該抗原的特異性自身抗體,這些抗體會像“鑰匙找到鎖”一樣,特異性結合到孔壁上固定的抗原上。
3. 標記“追蹤器”(酶標二抗結合):
* 洗去未結合的樣本成分。
* 加入酶標記的二抗。這種二抗能識別并結合人抗體(如人IgG)。常用的酶包括辣根過氧化物酶 (HRP) 或堿性磷酸酶 (AP)。
* 酶標二抗只會結合到那些已經與抗原結合的自身抗體上(即形成“抗原-自身抗體-酶標二抗”復合物)。
4. 顯色“信號放大”(底物反應):
* 再次洗板,徹di洗去未結合的酶標二抗。
* 加入酶的特異性底物溶液。
* 結合在復合物上的酶會催化底物發生反應,產生可測量的信號(通常是顏色的變化,吸光度值增加)。
5. 解讀“信號密碼”(結果判定):
* 使用酶標儀測量每個孔在特定波長下的吸光度 (OD值)。
* OD值與樣本中目標自身抗體的濃度成正比。
* 通過與試劑盒提供的標準曲線或臨界值 (Cut-off) 比較,即可判斷樣本為陽性(存在該自身抗體)或陰性(不存在),并可進行定量或半定量分析。
ELISA在自身免疫疾病檢測中的關鍵優勢:
* 高靈敏度與特異性:能檢測出極低濃度的自身抗體,并準確區分目標抗體與非目標抗體。
* 高通量:可同時處理大量樣本,效率高,適合臨床實驗室常規檢測。
* 標準化與自動化:試劑盒提供標準化流程和試劑,易于操作,可適配自動化設備,結果穩定可靠。
* 定量能力:許多ELISA試劑盒可提供抗體濃度數值,有助于疾病活動度監測(如SLE患者的抗dsDNA抗體水平變化)和治療效果評估。
展望未來:
ELISA技術持續發展,多重檢測技術(如多重微珠免疫分析)正嶄露頭角,可同時檢測一份樣本中的多種自身抗體,提供更全面的信息。自動化程度的提升也將進一步提高檢測效率和標準化水平。
上海科博瑞生物科技有限公司ELISA試劑盒憑借精準、高效、可靠的特點,深受廣大科研工作者的青睞。通過特異性捕獲和量化血液中的“罪魁禍首”——自身抗體,ELISA為臨床醫生提供了關鍵的診斷依據,助力疾病的早期識別、精準分型和有效管理,為患者帶來更及時、更個體化的診療方案。
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