雅致放射毛霉（Actinomucor elegans）是腐乳生產中的核心菌種，其蛋白酶的高效生產與培養基的優化密切相關。以下是其培養基確定方法與關鍵參數：

一、基礎培養基配方

1、種子培養基

組成（200mL）：豆粕粉6g、飴糖1g、酵母膏0.2g、MgSO? 0.4g、KH?PO? 0.4g。

滅菌條件：121℃高壓滅菌20分鐘，接種前需在超凈臺內紫外滅菌20分鐘。

2、產酶培養基（基礎配方）

組成（1000mL）：豆粕粉30g、蔗糖8g、酵母膏1g、MgSO? 3.6g、KH?PO? 1.2g、CaCl? 1g。

優化方向：通過單因素和正交實驗發現，蔗糖添加量提高至10%、黃豆粉2.5%、KH?PO? 0.4%、CaCl? 0.11%時，中性蛋白酶活力可達1310.56 U/mL，較基礎配方提高60.1%。

二、培養基優化關鍵因素

1、碳源選擇

碳源為蔗糖或飴糖，其濃度優化為10%時顯著提升酶活力79。可溶性淀粉也可作為替代碳源，但效果略遜于蔗糖。

2、氮源選擇

豆粕粉是主要氮源，添加量優化為2.5%-3.0%時酶活力79。酵母膏作為輔助氮源，推薦添加量0.1%-0.5%。

3、無機鹽與微量元素

MgSO?和KH?PO?對菌體生長和產酶至關重要，建議添加量分別為0.2%-0.4%和0.2%-0.4%26。CaCl?的添加量需控制在0.07%-0.11%，過高可能抑制酶活。

三、培養條件優化

1、溫度與pH

培養溫度為28℃，初始pH 7.5-8.5（中性蛋白酶pH為7-8）。

2、通氣與攪拌

液體深層發酵時，前期通風量1:0.8，后期調整為1:1.5-2.0，全程無需機械攪拌，培養時間18-20小時。

3、接種量與搖床轉速

接種量5%-10%，搖床轉速220-250 rpm可促進菌絲生長和蛋白酶分泌。

四、酶活力測定方法

1、定義：1g固體酶粉在40℃、pH 7.5條件下，每分鐘水解酪素產生1μg酪氨酸為1個酶活單位（U/g）。

2、測定步驟：

使用紫外分光光度法（275 nm波長）測定酪氨酸生成量。

計算酶活力時需引入吸光常數K（通常取135）和稀釋倍數，公式為：

X=2/5×A×K×n×E

其中，A為吸光度，n為稀釋倍數，E為換算系數（取0.50）。

五、實際應用與優化效果

通過培養基優化（如蔗糖濃度提升至10%、豆粕粉比例調整），雅致放射毛霉的中性蛋白酶活力可從基礎條件的約800 U/mL提高至1300 U/mL以上。這一成果為縮短腐乳后酵周期及工業化生產提供了技術基礎。

微生物菌種查詢網，本站隸屬于北京百歐博偉生物技術有限公司，單位現提供微生物菌種及其細胞等相關產品查詢、咨詢、訂購、售后服務！與國內外多家研制單位，生物醫藥，第三方檢測機構，科研院所有著良好穩定的長期合作關系！歡迎廣大客戶來詢！