Vector Laboratories公司TrueVIEW自發熒光淬滅試劑盒:常見問題解答
本篇為大家帶來的是Vector品牌的TrueVIEW自發熒光淬滅試劑盒常見問題解答,如大家想購買該試劑盒產品,或咨詢更多關于該產品的問題,技術方面的支持,都可以聯系Vector全國總代理商—欣博盛生物。
1、是否有已發表的參考文獻描述了TrueVIEW自發熒光淬滅試劑盒的應用?
答:是的。在科學文獻中有多篇已發表的參考文獻描述了該試劑盒的應用。具體請在SP-8400產品詳情頁的Citations部分中查閱相關參考文獻。
2、在應用TrueVIEW自發熒光淬滅試劑后的清洗步驟中,我可以使用PBS以外的緩沖液或去垢劑嗎?
答:不可以。我們發現使用TBS或HEPES緩沖液清洗會導致TrueVIEW試劑從組織脫落;去垢劑也是不相容的。
3、TrueVIEW工作液可以保存多久?
答:TrueVIEW工作液一旦配制完成后,可在工作臺或冰箱中(2-8℃)保存約48小時,可維持其活性或功能。而超過48小時,則建議丟棄未使用的TrueVIEW工作液并根據實驗需要配制新的工作液。
4、TrueVIEW能減少由脂褐素引起的自發熒光嗎?
答:TrueVIEW不能減少由脂褐素引起的自發熒光。TrueVIEW的工作液通過靜電作用機制,能顯著減少或消除因使用醛類固定劑而引起的熒光;也能有效減少來自膠原蛋白、彈性蛋白和紅細胞等組織成分的熒光。
5、當使用TrueVIEW時,我的組織切片變成藍色的了,這是正常的嗎?
答:這是正常的。TrueVIEW工作液呈藍色,會將組織切片“染成”藍色,這表示該試劑正在發生反應。不過切片上的藍色不會發出熒光,不會干擾免疫熒光應用。
6、使用TrueVIEW時,我可以使用哪些封片劑?
答:兩種TrueVIEW產品(SP-8400和SP-8500)均隨附提供2 mL的VECTASHIELD® Vibrance防熒光淬滅封片劑,建議使用隨附的封片劑以獲得最佳效果。我們發現,在使用TrueVIEW時,封片劑對維持高信噪比起著關鍵作用。目前,我們暫無充分的數據證明其他供應商的封片劑可以和TrueVIEW搭配使用。如果用其他封片劑替代VECTASHIELD® Vibrance,可能會導致效果不佳。
7、為什么TrueVIEW自發熒光淬滅試劑要在免疫熒光(IF)完成后才使用,而不是在實驗流程開始時使用?
答:在產品開發過程中,我們發現將TrueVIEW淬滅試劑應用在標準免疫熒光流程結束后,能實現最-理-想的自發熒光信號減弱效果。該試劑在封片時仍保留在組織上,從而實現持續的淬滅作用,并且對特異性的熒光信號幾乎不產生任何影響。然而,在染色流程非常簡短的應用中(例如使用直接與熒光基團偶聯的一抗),在實驗開始時應用TrueVIEW淬滅試劑可能同樣有效。
TrueVIEW自發熒光淬滅試劑盒
VectorLabs公司提供的True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit試劑盒,旨在去除組織切片中由于醛固定、紅細胞以及膠原蛋白/彈性蛋白結構造成的自發熒光。該試劑盒包含防熒光淬滅的VECTASHIELD Vibrance Antifade Mounting Media 封片劑(含或不含DAPI兩種)。客戶無需單獨購買封片劑,經濟、實用。
True VIEW™ Autofluorescence Quenching Kit | ||
貨號 | SP-8400-15 | SP-8500-15 |
規格 | 1kit | 1kit |
染色切片數 | 100-150 | 100-150 |
是否含DAPI | 不含DAPI | 含DAPI |
試劑盒組成 | Vector TrueVIEW Reagent A,5ml Vector TrueVIEW Reagent B,5ml Vector TrueVIEW Reagent C,5ml VECTASHIELD Vibrance® Antifade Mounting Medium,2ml | Vector TrueVIEW Reagent A,5ml Vector TrueVIEW Reagent B,5ml Vector TrueVIEW Reagent C,5ml VECTASHIELD Vibrance® Antifade Mounting Medium with DAPI,2ml |
SP-8400-15使用案例:
樣本:人胰腺(FFPE),染色胰島素(綠色),DAPI(藍色)。未使用TrueVIEW處理(左圖);使用TrueVIEW處理(右圖),自發熒光明顯減少,特異性染色得以保留。
SP-8500使用案例:
樣本:人扁桃體(FFPE),染色AE1/AE3(綠色),DAPI(藍色)。未使用TrueVIEW處理(左圖),使用TrueVIEW處理(右圖),自發熒光明顯減少,特異性染色得以保留。
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