支原體是實驗室中常見的污染細胞的原核生物,污染主要來源包括細胞和毒種,以及血清、雞胚、原代細胞等動物性原材料和操作者本身,數據顯示,約有 15%-35%的細胞存在支原體污染。支原體會改變宿主細胞的結構和功能等一系列特征,造成實驗結果不準確;干擾細胞代謝和生長,改變核酸合成,影響細胞抗原性,導致染色體改變,干擾病毒復制以及模仿病毒的作用。因此,檢測并去除支原體,對細胞培養非常重要,可以說要想細胞養得好,支原體去除不可少。
去除細胞支原體污染,面臨的第一個挑戰就是如何檢測細胞中可能存在的支原體污染。支原體是一類無細胞壁、直徑約 0.1-0.3 μm 的原核微生物,常規的革蘭氏染色無效,光學顯微鏡下難以觀察。而且,部分支原體(如口腔支原體)可與宿主細胞建立潛伏感染,不引起明顯細胞病變,難以察覺。
經典的檢測支原體的方法是培養法及指示細胞法,但兩種方法耗時太久,且培養條件相對較為苛刻,在過程中易受污染,造成檢測結果偏差。基于生命科學的發展,目前已有一些更為高效和準確的方法來替代傳統方法。依據《歐洲藥典》中<2.6.7>中指出,在適當的驗證之后,核酸擴增技術NAT可以代替培養法和指示細胞培養法。NAT法靈敏度高,耗時也相對較短。基于支原體特異性激酶的表達情況的生化檢測法,則耗時更短,在20-30min內即可完成對支原體的檢測,靈敏度也接近NAT法,更適合于對支原體污染進行快速檢測判斷。
| 培養法 | 指示細胞法 | NAT(核酸擴增技術) | 生化法 |
時間 | 28 天 | 4-5 天 | 2-5 小時 | 20 分鐘 |
靈敏度 | 10 cfu/mL | 100 cfu/mL | 10 cfu/mL | 50 cfu/mL |
特異性 | 沒有單一方法的特異性能達到 100%,通常用兩種方法組合以提高特異性 |
表1:常用的支原體檢測方法對比
愛必信針對支原體檢測,推出兩款快速檢測產品,分別基于NAT和激酶生化檢測技術,半小時內即可完成檢測,靈敏度高達10 cfu/mL,助力快速檢測支原體污染。
abs90062 一步法快速支原體檢測試劑盒(等溫擴增法),利用等溫擴增技術與可視化顏色變化能夠快速檢測細胞培養液中常見的 8 種支原體。30 min內搞定檢測,無需儀器。
產品特點:
1、等溫擴增技術,靈敏度高;
2、操作簡單,無需PCR儀及開蓋電泳;
3、實驗快速,30 min即可完成實驗;
4、無需檢測儀器,結果可視化;
abs90283 MYCO-LTM 熒光素酶支原體檢測試劑盒,可特異性的檢測活支原體產生的真核細胞不表達的激酶,這些激酶可以將 ADP 轉化為 ATP。能夠30 min內快速檢測包括常見的8種和其他多種常見活支原體。
產品特點:
1、生物發光檢測,靈敏度高;
2、操作簡單,均相反應,兩次讀數;
3、實驗快速,30 min即可完成實驗;
4、信噪比高,媲美進口Lon**品牌;
其他支原體檢測產品
貨號 | 品名 | 規格 | 原理特點 |
abs90062 | 一步法快速支原體檢測試劑盒(等溫擴增法) | 50T | 等溫擴增,30min快檢,無需PCR儀,可視結果。 |
abs90283 | MYCO-LTM 熒光素酶支原體檢測試劑盒 | 10 & 25 & 50T | 支原體激酶發光法,靈敏度接近NAT法,20min快檢。 |
abs90199 | 發光法支原體檢測試劑盒 | 20 & 200T | 支原體激酶發光法,30 min完成實驗。 |
abs9252 | 支原體染色檢測試劑盒 | 100T | Hoechst染色檢測,形態觀測 |
abs9588 | 支原體檢測試劑盒(PCR法) | 50T | NAT法PCR檢測,需電泳 |
abs9925 | 支原體檢測試劑盒(qPCR法) | 50T | NAT法,qPCR檢測,Taqman 探針,qPCR儀實時讀數 |
abs90284 | MYCO-T™巢式PCR支原體檢測試劑盒 | 25 & 50T | NAT法,巢式PCR,兩步擴增,靈敏度更高,需電泳 |
除檢測試劑外,愛必信還提供全套支原體預防及清除試劑,助力遠離支原體困擾
貨號 | 品名 | 規格 | 特點 |
abs9253 | 支原體清除試劑 | 20mg/100mg | 多肽類,無抗藥性 |
abs9254 | 支原體清除試劑Plus | 10mg | 天然抗生素,可預防可清除 |
abs9376 | 支原體預防劑 | 500uL/500uLx4 | 多肽類,無抗藥性 |
abs9843 | 清除支原體噴劑 | 280mL | 多肽類,5-10min可根chu |
愛必信其他常用熱賣細胞培養污染清除產品
貨號 | 品名 | 規格 |
abs9244 | 青霉素-鏈霉素溶液(100x,雙抗) | 100mL |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液(100x,三抗) | 100mL |
abs9246 | 青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液(100x,三抗) | 100mL |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10mL |
abs9596 | 青霉素G鈉鹽溶液(100x) | 100mL |
abs9593 | 兩性霉素B溶液(10mg/mL) | 10mL |
abs9594 | 制霉菌素溶液(10mg/mL) | 10mL |
abs9595 | 鹽酸環丙沙星溶液(20mg/mL) | 10mL |
abs9841 | 黑膠蟲清除劑PLUS(500x) | 400uLx5 |
abs9842 | 黑膠蟲預防劑(1000x) | 500uLx5 |
abs9371 | 水浴鍋抑菌劑 | 100mL |
abs9372 | 培養箱除菌劑 | 480mL |
abs9373 | 細胞房除菌劑 | 480mL |
abs9374 | 水盤抑菌劑 | 20mL |
支原體污染防控需貫穿 “檢測 - 清除 - 預防” 全流程
定期檢測:對珍貴細胞株建議每傳代一次進行 NAT 或生化法檢測;
應急處理:發現污染后立即使用 abs9253 等清除試劑,配合傳代離心法降低支原體載量;
環境管控:使用專用消毒劑定期處理培養箱、超凈臺,血清等耗材需嚴格質檢。
通過專業化的檢測產品與標準化操作流程,可有效構建細胞培養的支原體防護屏障,保障科研實驗的穩定性與可靠性。
Absin產品線:
爆款產品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細胞培養(類器官試劑盒+基質膠,胎牛血清+培養添加劑+細胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
特色產品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
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