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【微課堂】生物指示劑培養周期確定依據

來源:浙江泰林生物技術股份有限公司   2025年07月30日 16:18  

 

根據GB/T 18281.1-2024 《醫療保健產品滅菌 生物指示物 第1部分:通則》生物指示劑的培養時間一般為7天。但是在接收成品生物指示劑時,你可能會發現說明書上標示的生物指示劑培養時間是7天、48h、24h,甚至是更短的3h、30min,這些小于要求的培養時間是怎么確定的呢?


縮短生物指示劑培養時間需依據ISO 11138-8:2021Sterilization of health care products — Biological indicators —Part 8: Method for validation of a reduced incubation time for a biological indicator開展實驗,根據實驗結果確認最短的培養時間。該標準的等同替代國家標準為GB/T 18281.8 - 2024《醫療保健產品滅菌 生物指示物 第8部分:縮短生物指示物培養時間的確認方法》,于2024年11月發布,將于2026年06月正式實施。

For example


以泰林SS6-121型自含式壓力蒸汽滅菌生物指示劑的縮短培養時間測試結果為例我們詳細介紹如何確認生物指示劑的縮短培養時間。

01



確認生物指示劑在部分周期滅菌的條件,使生物指示劑在此周期中滅菌,培養7天后預期有30%~95%呈現陽性。

將待測批次生物指示劑在抗力儀中121℃滅菌16min,培養7天后,生物指示劑的陽性率為70%,認為該滅菌時間符合預期要求;假如在相同條件下,生物指示劑培養7天后的陽性率低于30%或高于95%,則認為該滅菌時間不符合預期,需要調整滅菌時間,使滅菌后生物指示劑的陽性率在30%~95%之間;表1介紹了該款生物指示劑滅菌時間的篩選過程,三批次生物指示劑在滅菌時間為16min時,陽性率在40%~65%之間,均符合要求。可以確認后續的滅菌條件為:121℃,16min。


02



 取3批次該產品,每批次100支生物指示劑,按照步驟(01)中確認的滅菌時間進行殺滅,即抗力儀中121℃滅菌16min。

03



殺滅結束后,按說明書要求進行接種操作,并轉移至規定的培養條件下培養7天。按照預先確定的時間間隔,記錄生物指示劑的陽性結果和陰性結果。例如,設定的時間間隔為24h,每隔24h進行結果記錄,最終的培養時間結果以“h”為單位。測試結果見表2。

04



在相同的培養時間間隔下,3批次生物指示物陽性的數量與第7d的陽性生物指示物數量之間的相關度≥97%,即表2中“生長比例”≥97%,可以確認為最短的培養時間。計算公式如下:

由表2可知,第一次批次和第二批次指示劑在培養24h時,生長比例均<97%,無法以“24h”作為最短培養時間;當培養時間為48h時,三批次生物指示劑的生長比例均為100%,滿足標準中“≥97%”的要求,可以選擇48h作為該生物指示劑的最終培養時間。因此,泰林SS6-121型自含式壓力蒸汽滅菌生物指示劑的說明書標示的培養時間為48h。

目前,該方法在醫療器械、醫院等應用廣泛,如快速生物指示劑(培養時間一般為3h)、極速生物指示劑(培養時間一般為30min),這些生物指示劑呈陽性的確認主要通過檢測生物指示劑的熒光強度。2023版《藥品GMP指南》中明確指出,ISO 11138-8:2021Sterilization of health care products — Biological indicators —Part 8: Method for validation of a reduced incubation time for a biological indicator中描述了縮短培養時間的方法,只適用于特定行業(如醫院或者醫療保健機構)下和某些生物指示劑,并不適用于制藥行業。

ISO 11138-8規定的縮短生物指示劑培養時間的確認方法,確認滅菌時間后至少需要3批次生物指示劑,各100支,通過持續觀察滅菌后生物指示劑陰性、陽性的數量,以確認最短的培養時間。

那么,現在你理解縮短生物指示劑培養時間是如何確認的了嗎?





 

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