恒奧德儀器新品薄層色譜系統 薄層色譜掃描儀操作步驟
薄層色譜法(TLC)是一種利用各組分在固定相和移動相之間吸附能力差異進行分離的色譜技術,其核心原理基于物質在兩相中的分配系數不同。 ?
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基本原理
薄層色譜通過吸附劑(如硅膠)作為固定相,樣品溶液點在薄層板上后,展開劑(流動相)沿板流動。各組分因吸附能力不同,在固定相上的停留時間不同,從而按不同距離移動。例如,吸附力強的組分移動慢,吸附力弱的組分移動快,最終實現分離。 ?
操作步驟
?點樣?:將樣品溶液用毛細管點在薄層板一端,通常基線距底邊0.5~1.0厘米,點樣直徑1-2毫米,點間距離0.5~1.0厘米。 ?
?展開?:加入展開劑(如石油醚/乙酸乙酯混合液),利用毛細管作用沿板流動。展開過程中需控制環境溫濕度,避免邊緣效應影響分離效果。 ?
?檢測?:根據組分顯色特性觀察斑點位置,常用方法包括直接觀察顏色、紫外燈下觀察熒光或噴顯色劑。 ?
關鍵參數
?Rf值?:組分移動距離與展開劑前沿距離的比值,用于定性分析,理想范圍為0.15~0.85。 ?
?顯色方法?:根據化合物性質選擇碘顯色、紫外檢測或特定試劑顯色。 ?
該方法具有操作簡便、成本低、樣品量少等優點,但分離效率較低,適用于小分子極性物質的初步分析。
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