一、產(chǎn)品信息

平臺編號：Bio-104370

規(guī)格：1×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

細胞信息：原代細胞

產(chǎn)品名稱：人脂肪間充質(zhì)干細胞

組織來源：脂肪組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

用途：研究

注意事項：僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用（產(chǎn)品信息以出庫為準）

二、細胞簡介

人脂肪間充質(zhì)干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞，簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比，在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是，脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞，且獲取過程中對機體損傷更小，是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài)，BrdU可標記其細胞核。

三、方法簡介

實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

四、質(zhì)量檢測

實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干細胞經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

五、培養(yǎng)信息

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人脂肪間充質(zhì)干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的培養(yǎng)狀態(tài)。

六、人脂肪間充質(zhì)干細胞接收后的操作流程與注意事項

1、細胞收到后建議在培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時左右再依據(jù)細胞密度，換液培養(yǎng)或傳代。

2、如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞及時離心，加15%血清的培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶中繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的培養(yǎng)基，培養(yǎng)2-3天。若3天后細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室，技術(shù)人員會跟進解決。

3、貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（不超過20%），或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

4、生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)生長不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重新打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

七、人脂肪間充質(zhì)干細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵守無菌操作）

1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）。

2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁運動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。

3、取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

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