DeNovix細胞計數器使用方法如下:
一、使用前準備
儀器放置
確保儀器水平放置在穩固的工作臺上,遠離強電磁場干擾源(如電視、電腦、手機等),以防止電磁干擾影響性能。
檢查電源電壓是否在規定范圍內,避免因電壓不穩定導致儀器損壞。
樣品準備
臺盼藍染色法(用于活/死細胞分析):
制備4%臺盼藍母液:稱取4g臺盼藍,加少量蒸餾水研磨,加雙蒸水至100ml,用濾紙過濾后4℃保存。
細胞懸液與0.4%臺盼藍溶液按9:1混合(終濃度0.04%),輕輕吹打混勻。
樣品體積:根據儀器型號選擇合適體積(如CellDrop型號支持5.0µL高密度、10µL標準、40µL低密度樣品)。
儀器清潔
若先前的樣品在樣品室表面干燥或不易加載,需清潔樣品表面:
降下測量臂,將15µL 70%乙醇移入對準槽和樣品室,等待10秒鐘。
用干燥的實驗室擦拭巾用力擦拭上下表面,確保無殘留。
二、操作流程
啟動儀器
按下電源按鈕,開啟儀器,顯示開啟界面。
啟動Easy Apps計數應用程序(部分型號如CellDrop自動進入測量界面)。
加載樣品
傳統型號(需細胞計數板):
將10µL樣品混合物加入到細胞計數板一側的計數池口中(計數板兩個計數池分別標記為“A”和“B”)。
插入細胞計數板,確保插入正確(聽到“咔嗒”聲表示放置到位)。
CellDrop型號(無需載玻片):
放下測量臂,將10µL細胞懸液直接移入腔室。
等待細胞沉降(約數秒)。
調整與計數
實時預覽與對焦:
放下測量臂后開始實時預覽,檢查視野是否清晰。
觸摸對焦圖標,在查看明場時調整圖像,使活細胞呈現明亮的中心和黑暗的輪廓,死細胞呈均勻藍色。
曝光調整:
觸摸曝光圖標,選擇正?;虻推毓饽J?活細胞應具有白色中心和深色環)。
啟動計數:
按“計數(Count)”按鈕,儀器自動分析并顯示結果(包括細胞濃度、尺寸、存活率等)。
可調整設門(gating)以排除碎片或另類細胞群(可選)。
按“優化設置(Optimize Settings)”調整計數設置并重新分析圖像(可選)。
結果查看與保存
測量完成后,抬起測量臂(CellDrop型號),結果自動保存。
在應用程序中查看結果,或使用“數據(Data)”應用重新分析保存的結果。
根據需要導出結果(支持Wi-Fi、USB、電子郵件、以太網等多種方式)。
三、使用后維護
清潔樣品室
用干凈、干燥的實驗室擦拭巾擦除樣品,避免殘留物影響下次測量。
蓋上防塵蓋,防止灰塵進入。
關閉儀器
關閉應用程序,按下電源按鈕關閉儀器。
拔下電源插頭,確保安全。
定期校準與保養
定期進行校準和性能檢查,確保測量結果的準確性和可靠性。
避免使用腐蝕性強的清潔劑,內部清潔應由專業人員進行。
長期不用時,存放在干燥通風的環境中,防止灰塵和濕氣損害儀器。
四、DeNovix細胞計數器注意事項
操作規范
避免將氣泡引入樣品溶液中,混合或點樣時需緩慢操作。
避免在點樣后將樣品回抽至移液器吸頭,防止交叉污染。
確保所有樣品濃度在儀器的檢測范圍內(如7×10²~4×10? cells/ml)。
安全防護
遵循制造商提供的安全操作規程,佩戴防護裝備(如手套、護目鏡)操作臺盼藍等染色劑。
若發現儀器故障或性能下降,及時聯系制造商或專業技術人員維修。
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