副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus），為革蘭氏陰性桿菌，呈弧狀、桿狀、絲狀等多種形狀，無芽孢。進食含有該菌的食物可致食物中毒，也稱嗜鹽菌食物中毒。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。副溶血性弧菌是一種海洋細(xì)菌，主要來源于魚、蝦、蟹、貝類和海藻等海產(chǎn)品。此菌對酸敏感，在普通食醋中5分鐘即可殺死；對熱的抵抗力較弱。

一、菌株簡介

副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus,VP）是一種嗜鹽性細(xì)菌。副溶血性弧菌食物中毒，是進食含有該菌的食物所致，主要來自海產(chǎn)品，如墨魚、海魚、海蝦、海蟹、海蜇，以及含鹽分較高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力強，在抹布和砧板上能生存1個月以上，海水中可存活47天。臨床上以急性起病、腹痛、嘔吐、腹瀉及水樣便為主要癥狀。本病多在夏秋季發(fā)生于沿海地區(qū)，常造成集體發(fā)病。由于海鮮空運，內(nèi)地城市病例也漸增多。

此菌對酸敏感，在普通食醋中5分鐘即可殺死；對熱的抵抗力也較弱。副溶血性弧菌食物中毒多發(fā)生在6~10月，海產(chǎn)品大量上市時。中毒食品主要是海產(chǎn)品，其次為咸菜、熟肉類、禽肉、禽蛋類，約有半數(shù)中毒者為食用了腌制品后。中毒原因主要是烹調(diào)時未燒熟煮透或熟制品被污染。

二、生物學(xué)特征

副溶血弧菌系弧菌科弧菌屬，革蘭染色陰性，兼性厭氧菌，為多形態(tài)桿菌或稍彎曲弧菌。本菌嗜鹽畏酸。宜的培養(yǎng)基：溫度為30℃—37℃，含鹽2.5%—3%(若鹽濃度低于0.5%則不生長），pH值為8.0—8.5。本菌對酸較敏感，當(dāng)pH6以下即不能生長，在普通食醋中l(wèi)一3min即死亡。在固體培養(yǎng)基上菌落常隆起，圓形，表面光滑，濕潤。在3%一3．5%含鹽水中繁殖迅速，每8～9min為一周期。對高溫抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被殺死。本菌對常用消毒劑抵抗力很弱，可被低濃度的酚和煤酚皂溶液殺滅。

三、臨床表現(xiàn)

潛伏期自1小時至4天不等，多數(shù)為10小時左右。起病急驟，常有腹痛、腹瀉、嘔吐、失水、畏寒及發(fā)熱。腹痛多呈陣發(fā)痛，常位于上腹部、臍周或回盲部。腹瀉每日3～20余次不等，大便性狀多樣，多數(shù)為黃水樣或黃糊便。約2%～16%呈典型的血水或洗肉水樣便，部分病人的糞便可為膿血樣或粘液血樣，但很少有里急后重。

由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表現(xiàn)為急發(fā)病，潛伏期2~24h，一般為10h發(fā)病。主要的癥狀為腹痛，優(yōu)勢腹痛在臍部附近劇烈。腹痛是本病的特點，多為陣發(fā)痛，并有腹瀉、嘔吐、畏寒發(fā)熱，大便似水樣。便中混有黏液或膿血，部分病人有里急后重，重癥患者因脫水，使皮膚干燥及血壓下降造成休克。少數(shù)病人可出現(xiàn)意識不清、痙攣、面色蒼白或發(fā)紺等現(xiàn)象，若搶救不及時，呈虛脫狀態(tài)，可導(dǎo)致死亡。

由于吐瀉，患者常有失水現(xiàn)象，重度失水者可伴聲啞和肌痙攣，個別病人血壓下降、面色蒼白或發(fā)紺以至意識不清。發(fā)熱一般不如菌痢嚴(yán)重，但失水則較菌痢多見。國內(nèi)報道的副溶血弧菌食物中毒，臨床表現(xiàn)不一，可呈典型、胃腸炎型、菌痢型、中毒性休克型或少見的慢性腸炎型型。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢復(fù)較快。

預(yù)防措施與其他細(xì)菌所致者似。

1、動物性食品應(yīng)煮熟煮透再吃。

2、隔餐的剩菜食前應(yīng)充分加熱。

3、防止生熟食物操作時交叉污染。

4、梭子蟹、蟛蜞、海蜇等水產(chǎn)品宜用飽和鹽不浸漬保藏（并可加醋調(diào)味殺菌），食前用冷開水反復(fù)沖洗。

四、來源和傳播途徑

分布極廣，主要分布在海水和水產(chǎn)品中，我國華東地區(qū)沿岸的海水的副溶血性弧菌檢出率為47.5%~66.5%，海產(chǎn)魚蝦的平均帶菌率為45.6%~48.7%，夏季可高達(dá)90%以上。除了海產(chǎn)品以外，畜禽肉、咸菜、咸蛋、淡水魚等都發(fā)現(xiàn)有副溶血性弧菌的存在。

海水是本菌的污染源，海產(chǎn)品、海鹽、帶菌者等都有可能成為傳播本菌的途徑，另外有腸道病史的居民、漁民帶菌率偏高，也是傳染源之一。

預(yù)防措施包括：動物性食品應(yīng)煮熟煮透再吃；隔餐的剩菜食前應(yīng)充分加熱；防止生熟食物操作時交叉污染；海產(chǎn)品宜用飽和鹽水浸漬保藏（并可加醋調(diào)味殺菌），食前用冷開水反復(fù)沖洗。

五、發(fā)病機理

吞服10萬個以上活菌即可發(fā)病，個別可呈敗血癥表現(xiàn)。該菌有侵襲作用，其產(chǎn)生的TDH和TRH的抗原性和免疫性相似，皆有溶血活性和腸毒素作用，可引致腸袢腫脹、充血和腸液潴留，引起腹瀉。 TDH對心臟有特異性心臟毒，可引起心房纖維性顫動、期前收縮或心肌損害。有人發(fā)現(xiàn)脲酶病腹瀉有關(guān)。患者體質(zhì)、免疫力不同，臨床表現(xiàn)輕重不一，呈多型性。山區(qū)、內(nèi)陸居民去沿海地區(qū)而感染者病情較重，臨床表現(xiàn)典型；沿海地區(qū)發(fā)病者病情一般較輕。

六、流行病學(xué)

1、傳染源傳染源為病人，集體發(fā)病時往往僅少數(shù)病情嚴(yán)重者住院，而多數(shù)未住院者可能成為傳染源，但由于病人僅在疾病初期排菌較多，其后排菌迅速減少，故不至因病人散布病菌而造成廣泛流行。

2、傳播途徑本病經(jīng)食物傳播，主要的食物是海產(chǎn)品或鹽腌漬品，常見者為蟹類、烏賊、海蜇、魚、黃泥螺等，其次為蛋品、肉類或蔬菜。進食肉類或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起。

3、地區(qū)分布特點：日本及我國沿海地區(qū)為副溶血性孤菌食物中毒發(fā)病率的高發(fā)區(qū)。據(jù)調(diào)查，我國沿海水域、海產(chǎn)品中副溶血性弧菌檢出率較高，尤其是氣溫較高的夏秋季節(jié)。但近年來隨著海產(chǎn)食品的市場流通，內(nèi)地也有副溶血性弧菌食物中毒的散在發(fā)生。

4、季節(jié)性特點及易感性：7～9月常是副溶血性弧菌食物中毒的高發(fā)季節(jié)。男女老幼均可患病，但以青壯年為多，病后免疫力不強，可重復(fù)感染。

5、食物的種類：主要是海產(chǎn)品，其中以墨魚、帶魚、蝦、蟹多見，如墨魚的帶菌率達(dá)93%，其次為鹽漬食品。食品中副溶血性弧菌的來源：人群帶菌者對各種食品的直接污染。沿海地區(qū)飲食從業(yè)人員、健康人群及漁民副溶血性弧菌帶菌率為11.7%左右，有腸道病史者帶菌率可達(dá)31.6～88.8%。間接污染，沿海地區(qū)炊具的副溶血性弧菌帶菌率為61.9%，被副溶血性弧菌污染的食物，在較高溫度下存放，食用前加熱不或者生吃，或熟制品受到帶菌者、帶菌的生食品、帶菌容器及工具等的污染。

七、PCR檢測

用于檢測V．p的PCR方法主要有任意引物PCR(abritrarilyprimedPCR，Ap-PCR)、針對任意引物PCR、多重PCR(muhiplex-PCR)、實時PCR(Real-timePCR)。

1、任意引物PCRMatsumoto等采用任意引物PCR對V．p進行檢測。他們針對V。p的tdh基因和trh基因一段特異的序列，設(shè)計兩條引物，引物1：5--GGTGCGGGAA--3，引物2：5一GTTTCGCTCC一3，對1977～1998年所收集的227株V．p進行PCR。通過電泳分析發(fā)現(xiàn)，1996-1998年收集的22株血清型為03：K6菌株與1996年以前收集的03：K6血清型菌株基因序列有所不同，為03；K6血清型新出現(xiàn)的變異株，并最初出現(xiàn)在孟加拉國。這是目前的以基因為基礎(chǔ)的細(xì)菌亞分型方法。

2、針對任意引物PCR由于臨床分離株絕大多數(shù)含有tdh基因，因此絕大部分研究者都根據(jù)tdh設(shè)計引物進行特異擴增。1993年，Lee等根據(jù)tdh基因設(shè)計引物，對36株TDH+株、89株TDH-株以及46株其他弧菌和腸道菌進行PCR檢測。結(jié)果顯示，36株TDH+株全部特異擴增出來，其余菌株都沒有擴增；而檢測靈敏度高，檢測量可至40pgDNA，并可直接檢測糞便標(biāo)本，無需分離培養(yǎng)，方便快速。1999年，Kim等選擇toxR基因序列設(shè)計兩對引物，5’--GTCTTCTGACGCAATCGTTG--3和5’一ATACGAGTGGTTGCTGTCATG一3’，對14株V．p、14株其他弧菌進行PCR。結(jié)果顯示，14株V．p都得到一條368bp的特異擴增亮帶，而其他菌株沒有特異擴增。此外，Venkateswaran等選擇gyrB基因設(shè)計引物對V·p進行PCR、Cordova等選擇pR72H基因設(shè)計引物進行PCR，特異性、靈敏度都很好。

3、多重PCR由于不是全部副溶血性弧菌都含；tdh基因或，trh。基因，所以只針對tdh或trh的單一PCR，有時會漏檢。多重PCR(multiplex-PCR)能高效率地檢測Vpo1994年，Bej白等針對“、tdh、trh設(shè)計不同的引物對，在同一PCR反應(yīng)體系內(nèi)同時擴增tl、tdh、trh。結(jié)果顯示，所有的V。p都擴增出“基因，tl基因是V．p特異的；54%的V．p擴增出tdh基因；只有38．73%的V．p擴增出trh基因；該法靈敏度高，能把log牡蠣培養(yǎng)肉湯里10～100個V．p檢測出來。與其他常規(guī)生化方法相比，多重PCR更快速，僅8h就能完成檢測，結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠，而且還可改進成定量競爭PCR，對標(biāo)本中靶序列進行定量。

4、實時PCR常規(guī)PCR檢測，需要從反應(yīng)體系中吸取產(chǎn)物做電泳或Southern雜交等試驗進行鑒定，轉(zhuǎn)移過程中易污染，造成假陽性，而且耗費時間。1996年，Tyagi開創(chuàng)了一種實時PCR(Real-timePCP,)。實時PCR是在，PCR反應(yīng)體系中加入標(biāo)記有報告基團和淬滅基團的線性Taqman。探針或莖環(huán)型熒光分子信標(biāo)探針，在墓因擴增過程中，與產(chǎn)物雜交，此時，報告基團和淬滅基團分開，根據(jù)能量共振轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，報告基團發(fā)出熒光而被檢測。這種方法操作簡單，閉管檢測，減少污染，靈敏度高，并且可以在PCR結(jié)束或PCR過程進行同步定性或定量檢測，面且可以進行臨床大規(guī)模快速檢測。

八、治療措施

1、支持及對癥治療 脫水者需輸入生理鹽水及葡萄鹽水，或口服補液鹽，以糾正失水。血壓下降者，除被動補充血容量，糾正酸中毒等外，可酌用血管活性藥。

2、抗菌藥物 輕度患者可不用抗菌藥物，較重者可給復(fù)方新諾明或慶大霉素、阿米卡星和諾氟沙星等喹諾酮類抗菌藥物【上述抗生素類可能使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，使用須謹(jǐn)慎】。

3、發(fā)生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到醫(yī)院醫(yī)治。副溶血性弧菌對氯霉素敏感。嘔吐、腹瀉嚴(yán)重者要補充水和鹽。

九、中毒預(yù)防

加工海產(chǎn)品的案板上副溶血弧菌的檢出率為87.9%。因此，對加工海產(chǎn)品的器具必須嚴(yán)格清洗、消毒。海產(chǎn)品一定要燒熟煮透，加工過程中生熟用具要分開。烹調(diào)和調(diào)制海產(chǎn)品拼盤時可加適量食醋。食品燒熟至食用的放置時間不要超過4個小時。主要病理變化為空腸及回腸有輕度糜爛，胃粘膜炎、內(nèi)臟（肝、脾、肺）淤血等。

輔助檢查

1、白細(xì)胞計數(shù)總數(shù)多在1萬mm3以上，中性粒細(xì)胞偏高。

2、便檢查鏡檢可見白細(xì)胞或膿細(xì)胞，常伴有紅細(xì)胞，易被誤診為菌痢。糞便培養(yǎng)可檢出副溶血弧菌，絕大多數(shù)迅速轉(zhuǎn)陰，僅少數(shù)持續(xù)陽性2～4天。

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