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定期清洗是確保SEC色譜柱分離效果的關鍵方法

來源:島津(上海)實驗器材有限公司 SGLC   2025年08月13日 09:55  
   SEC色譜柱作為高效液相色譜(HPLC)分析中的核心組件,其性能直接影響到實驗結果的準確性和重現性。隨著使用時間的增長,SEC色譜柱可能會因樣品殘留、污染物積累等原因導致柱效下降,影響分離效果。為了延長使用壽命并保持其性能,定期進行清洗維護很重要。
 

 

  一、為什么要清洗?
 
  1、防止污染
 
  樣品中的雜質、未全溶解的顆粒物等會逐漸沉積在色譜柱內,導致柱壓升高、峰形變差甚至出現鬼峰。
 
  2、恢復柱效
 
  長期使用后,色譜柱內的固定相可能發生部分失活或堵塞,通過適當的清洗可以有效恢復其分離能力。
 
  3、延長壽命
 
  定期清洗有助于減少對色譜柱的損傷,從而延長其使用壽命,節省更換成本。
 
  二、常見的清洗溶劑及選擇依據
 
  1、水相溶劑
 
  對于反相色譜柱(如C18柱),首先可以使用純水或含有少量有機改性劑(如甲醇或乙腈)的水溶液進行初步沖洗,去除水溶性雜質。
 
  2、有機溶劑
 
  使用高比例的有機溶劑(如甲醇、乙腈)可以溶解并洗脫非極性污染物,適用于清洗脂溶性物質殘留。
 
  3、酸堿溶液
 
  對于強吸附性污染物,可選用稀釋的酸或堿溶液進行深度清洗。注意某些色譜柱不耐受pH值,需根據說明書選擇合適的清洗劑。
 
  4、專用清洗劑
 
  市面上也有專門針對色譜柱清洗的試劑,這些產品通常經過優化設計,能夠更有效地去除特定類型的污染物。
 
  三、具體清洗步驟
 
  1、準備階段
 
  在開始清洗前,先將色譜系統中的流動相切換為適合的清洗溶劑,并確保所有連接管道均已充滿清洗液。
 
  2、逐步沖洗
 
  以較低流速(例如0.5 mL/min)開始沖洗,逐漸增加至正常工作流速(通常為1-2 mL/min)。對于嚴重污染的色譜柱,建議分階段使用不同種類的清洗溶劑依次沖洗。
 
  3、循環清洗
 
  對于頑固性污染,可以通過設置循環模式,使清洗液多次通過色譜柱,增強清洗效果。一般情況下,每個階段的沖洗時間應不少于30分鐘。
 
  4、平衡與檢測
 
  清洗完成后,用初始流動相重新平衡色譜柱,并運行空白樣品或標準品,檢查柱效是否恢復正常。如果峰形和保留時間符合預期,則說明清洗成功。

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