動物細胞培養中,血清提供營養、激素、生長因子等,促進細胞生長。血清分多種類型和等級,選擇需考慮細胞需求、品質批次。儲存應低溫,使用前解凍搖勻。
動物細胞培養中,血清是一種關鍵的培養輔助物質,對細胞的生長、增殖和分化具有重要作用。以下是對動物細胞培養血清的詳細解析:
一、血清的來源與種類
血清是從血液中提取出來的液體部分,它富含細胞生長所需的營養物質、激素、生長因子和其他活性物質。根據來源動物的不同,血清可以分為多種類型,其中見的包括胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)、新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS)、小牛血清(Calf Serum)和成牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)等。
胎牛血清:采自5~8個月胎齡的牛胚胎,是細胞培養中的血清類型之一。由于其來源的特殊性,胎牛血清中富含多種生長因子和激素,對細胞的生長和增殖具有顯著的促進作用。
新生牛血清:采自出生后07天(或030天)內的小牛,其成分與胎牛血清相似,但某些生長因子的含量可能略低。
小牛血清:采自出生30天至1年的小牛,其成分與新生牛血清相近,但隨著時間的推移,某些生長因子的含量會逐漸下降。
成牛血清:采自成年牛,其成分相對較為穩定,但某些生長因子的含量可能較低,且可能含有一些對細胞生長不利的成分。
此外,根據血清的處理方式和品質,還可以將其分為特級、優級和標準級等不同等級。特級血清中內毒素含量極低,對細胞的毒性最小;優級血清的內毒素含量略高于特級,但仍適用于大多數細胞培養;標準級血清的內毒素含量較高,可能對某些敏感細胞產生不利影響。
二、血清在動物細胞培養中的作用
提供基本營養物質:血清中含有氨基酸、維生素、無機物、脂類物質和核酸衍生物等細胞生長所必需的物質。
提供激素和各種生長因子:血清中含有胰島素、生長激素、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子等多種生長因子和激素,這些物質對細胞的生長和分化具有重要作用。
提供結合蛋白:血清中的結合蛋白(如白蛋白、轉鐵蛋白)可以攜帶重要的低分子量物質(如維生素、脂肪和激素等),對細胞代謝有重要作用。
提供促接觸和伸展因子:這些因子有助于細胞貼壁生長,避免機械損傷。特別是在懸浮培養攪拌時,血清蛋白形成的粘度可以保護細胞免受損傷。
對培養中的細胞起到保護作用:血清中含有一些抗蛋白酶成分,可以中和胰蛋白酶的消化作用,保護細胞免受機械損傷。此外,血清還含有一些微量元素和離子,這些物質在代謝解毒中起重要作用。
三、血清的選擇與使用注意事項
根據細胞類型選擇血清:不同類型的細胞對血清的需求不同。例如,某些細胞可能對胎牛血清特別敏感,而另一些細胞則可能更適合使用新生牛血清或小牛血清。因此,在選擇血清時,需要了解目標細胞的生長特性和需求。
注意血清的品質和批次:不同批次、不同來源的血清在成分和活性上可能存在差異。因此,在使用血清時,需要選擇品質可靠、批次穩定的血清,并盡量避免頻繁更換血清批次,以免影響細胞的生長和實驗結果。
血清的儲存與處理:血清應儲存在-20℃或更低的溫度下,以避免蛋白質變性和細菌污染。在使用前,需要將血清解凍至室溫,并輕輕搖勻以確保成分均勻分布。此外,某些實驗可能需要對血清進行特殊處理,如熱滅活以去除補體等有害成分。但需要注意的是,熱滅活可能會導致某些生長因子的失活,因此需要根據實驗需求進行權衡。
綜上所述,動物細胞培養中的血清是一種重要的培養輔助物質,對細胞的生長、增殖和分化具有重要作用。在選擇和使用血清時,需要了解目標細胞的生長特性和需求,并注意血清的品質、批次以及儲存與處理等方面的細節問題。
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