了解酸性蛋白酶的活力測定方法，來滬鼎，搶先看！今天就是新年中的第二節氣雨水了，有的地方竟還是大雪紛揚的狀態中，上海已經有春天的跡象了。旁余之話我們不多說，下面就直接進入主題，春來雨問：以何方法來做酸性蛋白酶的活力測定？
    我們今天選擇的方法叫做福林法，您是不是想要問為什么呢？上海滬鼎就來回答您這個問題，這時因為福林試劑在堿性條件下可被酚類化合物還原呈藍色反應，由于蛋白質分子中有含酚基的氨基酸，它使蛋白質及其水解產物呈上述反應，利用這個方法原理可以測定蛋白酶活力的強弱。
    當我們在選擇方法的時候要為實驗做一個分析，由各種條件來做設想，zui后選擇一個合適的方法來做實驗。由此方法設想，我們來看看，它需要用到的試劑。
    l、福林試劑
    2、0.4mol/l的TCA溶液
    3、0.8mol/l的碳酸鈉溶液
    4、pH值為3.6的醋酸緩沖液
    5、2%酪蛋白溶液
    6、100μg/ml酪氨酸溶液
    再下一步的工作就是來繪制標準曲線，每一個朋友都要學會去分析，還有每一步需要做哪些步驟。我們所配制濃度分別為(單位：μg/ml)：0、20、40、60、80、100的酪氨酸溶液，各取lml(做4個平行樣)，加入不同的試管中，再各加入已稀釋的福林試劑lml和0.4mol/l的碳酸鈉5ml，搖勻，置于水浴鍋中，40℃保溫發色20min。然后在721型分光光度計上進行比色測定(波長660nm，以濃度為0μg/ml的酪氨酸反應液做空白對照)。
    實驗到這里算是完成了一半了，上海滬鼎在這里小小的說明一下哦！我公司酸性蛋白酶CAS號為9025-49-4，這里就是要跟您說近些天購買是有*活動的，一個方面是元宵節的*還沒結束，還有就是二月至三月的春季*，這個時候購買可以享受7.8折優惠，另外還送小禮物哦！好啦，下面就該到操作步驟的環節啦。
    活力測定操作步驟：稱取酶粉5g，充分碾細，加蒸餾水1000ml，在 4O℃水中攪拌3Omin，充分溶出酶蛋白，然后過濾，濾液用0.1mol/lpH值為3.6的醋酸緩沖液稀釋到一定倍數。取稀釋液1ml(做平行樣4個)，40℃水浴預熱2min，再各加入經同樣預熱的酪蛋白1ml，保溫10min。然后立即加入 0.4mol/l三氯醋酸2ml，終止反應。繼續置水浴中保溫20min，使殘余蛋白質沉淀，然后離心分離或過濾。取濾液lml，再加入0.8mol/l碳酸鈉溶液5ml和已稀釋的福林試劑1ml，搖勻保溫發色20min后，進行比色測定。對照標準曲線，計算酪氨酸的釋放量。
    zui后的一個方面就是計算，基本上來說，我們所做的實驗組成都是差不多的，都有原理技術等等之類的，要怎樣去計算呢？
    我們以酪蛋白為作用底物，在一定pH值和溫度下，同酶液反應，經一段時間后加入三氯醋酸，終止酶的反應，并使殘余的酪蛋白質沉淀，同水解產物分開。經過濾后取過濾液(含蛋白質水解產物的三氯醋酸溶液)，用Na2C03堿化，再加入福林試劑使之發色。藍色反應的強弱與過濾波中蛋白水解產物的量成正比例，而水解產物的量又同酶活力成正比。因此，根據藍色反應的強弱可以計算出蛋白酶的活力。
蛋白酶活力=A×4×N/10
式中：A——對照標準曲線得出的酪氨酸釋放量 
4--4ml反應液取出1ml 
N--酶粉的稀釋倍數 
10——反應時間10min 
    本文到這里已經為您說明完了用什么方法來做酸性蛋白酶的活力測定，以及其方法原因。了解我公司的產品價格以及其他信息都咨詢我公司哦！滬鼎生物的鈴聲期待因您撥而響起。