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生物試劑實驗室提取實驗技術的原理

來源:上海通蔚實業(yè)有限公司   2015年10月29日 14:36  

ELISA試劑盒中的試劑主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯仿時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
ELISA試劑盒是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。可以一步法或兩步法的形式進行。
ELISA試劑盒實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。

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