GW5074-NHS Ester是一種用于生物標記的化合物。 

基團分析：

GW5074的分子基礎：GW5074是一種選擇性c-Raf1激酶抑制劑，其核心結構含溴代吲哚環，通過抑制Raf/MEK/ERK信號通路調控細胞增殖，具有細胞膜滲透性強的特性。

NHS Ester的化學功能：NHS Ester是一種高反應性活化基團，可與生物分子的伯胺基發生親核取代反應，形成穩定的酰胺鍵（-CONH-），在GW5074-NHS Ester中，NHS Ester通過連接臂（如PEG鏈）與GW5074結合，使其具備靶向標記能力。

復合物結構：結構包含三部分：GW5074（激酶抑制功能域）、連接臂（PEG鏈，增強水溶性并減少空間位阻）、NHS Ester（共價結合域）。

中文名：GW5074-琥珀酰亞胺酯

英文名：GW5074-NHS Ester 

規格標準：1mg、5mg、10mg 

實驗步驟：

樣品準備：目標分子溶解于PBS或HEPES緩沖液（pH 7.5–8.5），避免含氨基試劑干擾。

試劑活化：GW5074-NHS Ester以無水DMSO配制成1–10 mM母液，冰上避光保存。

反應混合：按摩爾比混合，室溫或4℃避光反應2–4小時。

終止與純化：加入甘氨酸或冷甲醇終止反應，通過凝膠過濾/HPLC去除游離試劑。

產物驗證：SDS-PAGE或質譜確認標記效率。

注意事項：

pH控制：pH > 8.5可能致水解加速；pH < 7.0則反應效率下降。

防護措施：穿戴防護鏡、手套及口罩，避免皮膚接觸。

廢棄物處理：分類收集有機廢液，交由專業機構處理。

標記優化：高濃度蛋白（>2 mg/mL）可減少非特異性結合；低溫反應降低聚集風險。

相關應用：

激酶信號研究：標記抗體/蛋白質，用于Western Blot、免疫熒光檢測信號通路活性。

藥物靶向遞送：構建抗體-藥物偶聯物 。

細胞成像與追蹤：結合熒光基團，實現激酶定位的動態可視化。

診斷平臺開發：用于超高靈敏度免疫分析，通過信號放大提升檢測限。