高親水性：減少染料聚集，提升信號清晰度。

低分子量：對標記生物分子的結構和功能影響極小。

穩定性強：光穩定性優于傳統染料，適合長時間顯微觀察和單分子檢測。

熒光特性：強吸收、高熒光量子產率、高光穩定性和熱穩定性。

基本參數：  

英文名：ATTO 495 NHS Ester，AT 495 NHS Ester  

分子式：C25H29ClN4O8  

分子量：548.97 

規格標準：1mg、5mg、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關應用：

超分辨率顯微鏡：如PALM、dSTORM和STED，因其單分子檢測能力和抗光漂白特性。

流式細胞術（FACS）：標記抗體或探針，用于多色檢測。

核酸與蛋白質標記：

熒光原位雜交（FISH）：標記生物素化核酸探針。

蛋白質相互作用研究：通過生物素-鏈霉親和素系統追蹤分子結合。

其他應用：適用于單分子檢測和高分辨率顯微鏡技術。

使用方法：

1. 蛋白質標記

準備蛋白質溶液：

將目標蛋白質（如抗體）溶解在pH 7.2-7.4的PBS中，濃度建議大于2 mg/mL。

如果蛋白質溶解在Tris或甘氨酸緩沖液中，需通過透析或凝膠過濾去除游離胺或銨鹽。

準備染料溶液：

將ATTO 495 NHS Ester溶解在無水DMSO中，制備10 mM的染料儲備液。

避免長時間暴露在空氣中，現配現用。

標記反應：

按摩爾比1:10（蛋白質:染料）將蛋白質溶液與染料儲備液混合。

在室溫下避光反應2小時。

純化：

通過凝膠過濾（如Sephadex G-25柱）或超濾離心（如Amicon Ultra離心管，3–10 kDa截留分子量）去除未反應的染料。

2. 核酸標記

標記氨基修飾的寡核苷酸：

將氨基修飾的寡核苷酸溶解在pH 8.5的碳酸鹽緩沖液中。

按摩爾比1:10（寡核苷酸:染料）加入ATTO 495 NHS Ester。

在室溫下避光反應2小時。

通過凝膠過濾或超濾離心純化。

3. 流式細胞術（FACS）

標記抗體：

按上述蛋白質標記方法標記抗體。

將標記后的抗體用于細胞染色，按照標準流式細胞術程序進行。

4. 熒光原位雜交（FISH）

標記核酸探針：

按上述核酸標記方法標記生物素化的核酸探針。

將標記后的探針用于FISH實驗。 

注意事項：

避免頻繁凍融：染料儲備液應分裝保存，避免反復凍融。

保持干燥：操作過程中保持干燥，避免染料受潮。

現配現用：染料儲備液現配現用，避免長時間暴露在空氣中。

產品用途：僅供科研實驗使用

結構式：

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