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Aristolochic Acid-OVA Conjugate,馬兜鈴酸-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的應用

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    2025年07月24日
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Aristolochic Acid-OVA Conjugate,Aristolochic Acid-
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資料簡介

馬兜鈴酸-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物(Aristolochic Acid-Ovalbumin Conjugate,簡稱 AA-OVA)是一種通過化學交聯(lián)技術將馬兜鈴酸 I(Aristolochic Acid I)與雞卵清白蛋白(Ovalbumin,OVA)結合形成的復合物,在科研領域具有重要應用價值。以下是對其的詳細介紹:

一、核心特性

  1. 結構與組成

    • 馬兜鈴酸 I:一種具有生物活性的小分子化合物,天然存在于馬兜鈴屬植物中。

    • 雞卵清白蛋白(OVA):由 386 個氨基酸組成,分子量約 45 kDa,屬于含磷糖蛋白,具有良好的生物相容性和免疫原性。

    • 化學交聯(lián):通過共價鍵將馬兜鈴酸 I 與 OVA 連接,形成穩(wěn)定復合物,保留兩者的生物活性。

  2. 穩(wěn)定性與溶解性

    • 穩(wěn)定性:在特定條件下(如低溫、避光)穩(wěn)定,能保持生物活性和識別能力。

    • 溶解性:通常溶于 PBS(pH 7.4)中,蛋白濃度≥1 mg/ml,部分產(chǎn)品可通過有機溶劑或水溶解。

二、應用領域

  1. 抗體制備

    • 免疫原性:AA-OVA 可作為抗原免疫動物,誘導產(chǎn)生針對馬兜鈴酸的特異性抗體,用于后續(xù)研究或檢測。

    • 科研價值:制備的抗體可用于分析馬兜鈴酸的毒性機制、藥物代謝等過程。

  2. 免疫檢測

    • 檢測方法:AA-OVA 可包被于固相載體(如酶標板),用于 ELISA、免疫印跡等檢測,定量分析樣本中的馬兜鈴酸或其抗體。

    • 應用場景:藥物殘留檢測、疾病診斷(如馬兜鈴酸腎病相關研究)。

  3. 科研工具

    • 毒性機制研究:通過 AA-OVA 探究馬兜鈴酸與生物分子的相互作用。

    • 藥物開發(fā):作為模型化合物,篩選抑制馬兜鈴酸毒性的藥物或拮抗劑。

三、制備方法

  1. 化學交聯(lián)反應

    • 活化處理:將馬兜鈴酸 I 進行化學修飾,引入反應性基團(如羧基、氨基)。

    • 偶聯(lián)反應:在適宜條件下(如 pH、溫度),使活化后的馬兜鈴酸 I 與 OVA 的氨基或羧基通過共價鍵結合。

    • 純化與鑒定:通過透析、凝膠過濾等方法純化產(chǎn)物,并使用電泳、光譜分析等技術驗證偶聯(lián)成功。

  2. 常用交聯(lián)劑

    • 碳二亞胺法(EDC/NHS):利用 EDC 和 NHS 活化羧基,與氨基反應形成酰胺鍵。

    • 戊二醛法:通過醛基與氨基反應,形成交聯(lián)結構。

    • 馬來酰亞胺法:適用于巰基化修飾后的偶聯(lián)反應。

四、保存條件

  1. 溫度:建議保存于 -20℃ 或以下,避免高溫導致偶聯(lián)物失活或降解。

  2. 光照:需避光保存,防止光照對穩(wěn)定性的影響。

  3. 反復凍融:減少凍融次數(shù),避免性能損失。

  4. 保質期:在推薦條件下可長期保存(如 1 年或以上),具體需通過穩(wěn)定性試驗確定。

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