產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒中提試劑盒 現貨
產品貨號:CW2105S
額外試劑要求:
無水乙醇,異丙醇。
產品組分:
實驗前準備:
1.所有組分可在干燥、室溫(15-30℃)環境穩定保存1年,更長時間保存可置于2-8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩定保存6個月。
2.第一次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2–8℃保存,使用前需在室溫中放置一段時間,恢復至室溫后使用。
3.第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4.使用前請先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現結晶或沉淀,如有結晶或沉淀現象,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復澄清。
5.注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3,使用后應立即蓋緊蓋子。
6.提取質粒的量和純度與細菌培養濃度、菌株種類、質粒大小、質粒拷貝數等因素有關。
使用說明:
1.取5-15 ml過夜培養的菌液,加入離心管(自備)中,13,000 rpm(~16,200×g)離心1分鐘收集細菌,盡量吸棄全部上清。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮細菌沉淀。
3.向離心管中加入500 μl Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻8-10次,使菌體充分裂解,室溫放置3-5分鐘。此時溶液應變得清亮粘稠。
4.向離心管中加入500 μl Buffer E3,立即上下顛倒混勻8-10次,此時出現白色絮狀沉淀,室溫放置5分鐘。13,000 rpm離心5分鐘,吸取上清,將上清加入過濾柱(Endo-RemoverFM)中(已裝入收集管),13,000 rpm離心1分鐘過濾,將收集管中的濾液轉移到離心管(自備)中。
5.向濾液中加入450 μl異丙醇,上下顛倒混勻。
6.柱平衡:向已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DL)中加入200 μl Buffer PS,13,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7.將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉移到平衡好的吸附柱(已裝入收集管)中。
8.13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入750 μl Buffer PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。
10.將吸附柱重新放回收集管中,13,000 rpm離心1分鐘。
11.將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB,室溫放置2-5分鐘,13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質粒。
保存條件:室溫(15-30℃)
產品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規格
康為世紀 CW2105S EndoFree Plasmid Midi Kit 50 preps
產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒中提試劑盒 現貨
產品貨號:CW2105S
關于公司:
康為世紀是主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發與生產,為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創新型生物產品和服務。康為世紀建立了專業化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創新體系和開放式的合作創新平臺,構建成了公司完整的研發創新體系。產品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸·提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產業對進口試劑的依賴。
品牌介紹
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