產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒中提試劑盒 現貨折扣
產品貨號:CW2105S
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產品介紹:
本產品采用獨·特的硅基質膜吸附技術,在堿裂解法裂解細胞的基礎上,高效專一的結合質粒DNA。每次可處理5-15 mL菌液,獲得多至100 μg轉染級質粒DNA。使用特殊的去內毒素buffer ER,有效的去除內毒素、蛋白質等雜質。產品內另配備特殊指示劑CWBlue,保障質粒提取高效完成。
產品特點:
? 操作準確:加入顏色指示劑,保證操作的準確性,得到純度高、質量穩定的質粒。
? 提取得率高:適用于5-15mL菌液,質粒得率可多至100μg,提高實驗效率。
? 無內毒素:采用特殊的緩沖液系統和去內毒素Buffer,可獲得轉染級質粒。
? 適用范圍廣:適用于各種大小和高低拷貝數的目的質粒。
實驗案例:
1. 適用于高拷貝/低拷貝質粒提取
【實驗一】使用康為世紀無內毒素質粒中提試劑盒(CW2105)分別取7.5mL/15mL菌液提取高拷貝(p13)及低拷貝(PEGX)質粒,結果如下:
實驗結果表明:康為世紀無內毒素質粒中提試劑盒(CW2105)應用范圍廣,適用于高拷貝/低拷貝質粒提取,得到的質粒純度高,完整性好。
產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒中提試劑盒 現貨
產品貨號:CW2105S
額外試劑要求:
無水乙醇,異丙醇。
產品組分:
實驗前準備:
1.所有組分可在干燥、室溫(15-30℃)環境穩定保存1年,更長時間保存可置于2-8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩定保存6個月。
2.第一次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2–8℃保存,使用前需在室溫中放置一段時間,恢復至室溫后使用。
3.第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4.使用前請先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現結晶或沉淀,如有結晶或沉淀現象,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復澄清。
5.注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3,使用后應立即蓋緊蓋子。
6.提取質粒的量和純度與細菌培養濃度、菌株種類、質粒大小、質粒拷貝數等因素有關。
使用說明:
1.取5-15 ml過夜培養的菌液,加入離心管(自備)中,13,000 rpm(~16,200×g)離心1分鐘收集細菌,盡量吸棄全部上清。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 μl Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮細菌沉淀。
3.向離心管中加入500 μl Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻8-10次,使菌體充分裂解,室溫放置3-5分鐘。此時溶液應變得清亮粘稠。
4.向離心管中加入500 μl Buffer E3,立即上下顛倒混勻8-10次,此時出現白色絮狀沉淀,室溫放置5分鐘。13,000 rpm離心5分鐘,吸取上清,將上清加入過濾柱(Endo-RemoverFM)中(已裝入收集管),13,000 rpm離心1分鐘過濾,將收集管中的濾液轉移到離心管(自備)中。
5.向濾液中加入450 μl異丙醇,上下顛倒混勻。
6.柱平衡:向已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DL)中加入200 μl Buffer PS,13,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7.將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉移到平衡好的吸附柱(已裝入收集管)中。
8.13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入750 μl Buffer PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),13,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。
10.將吸附柱重新放回收集管中,13,000 rpm離心1分鐘。
11.將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位加入100-200 μl Endo-Free Buffer EB,室溫放置2-5分鐘,13,000rpm離心2分鐘。-20℃保存質粒。
保存條件:室溫(15-30℃)
產品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規格
康為世紀 CW2105S EndoFree Plasmid Midi Kit 50 preps
產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒中提試劑盒 現貨折扣
產品貨號:CW2105S
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