BY-0284 AAV-293腺病毒轉化的人胚腎細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0284
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/6/19 9:02:04
- 訪問次數 183
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AAV-293腺病毒轉化的人胚腎細胞系
AAV-293腺病毒轉化的人胚腎細胞系,是在 293 細胞基礎上進一步開發而來的細胞模型,293 細胞最初由人胚腎細胞經 5 型腺病毒(Ad5)DNA 轉染轉化而成,而 AAV-293 細胞則更專注于腺相關病毒(AAV)載體的生產與應用研究。在顯微鏡下觀察,AAV-293 細胞呈典型的上皮樣形態,多為多邊形或不規則形,以貼壁方式生長,細胞之間緊密相連,常形成鋪路石狀的單層細胞片層。細胞胞質豐富,經染色后呈嗜酸性,內部細胞器發達。線粒體呈短棒狀,均勻分布于胞質,為細胞高強度的代謝活動和病毒載體生產提供充足能量;粗面內質網附著大量核糖體,參與蛋白質合成;滑面內質網則與脂質代謝及藥物解毒相關;高爾基體呈網狀結構,負責蛋白質的修飾、加工與運輸;細胞核大而圓,位于細胞中央,核仁明顯,染色質分布均勻,顯示出細胞活躍的生命活動。
AAV-293 細胞系的生物學特性使其在基因治療和病毒載體研究領域備受青睞。由于經過腺病毒轉化,細胞內保留了腺病毒 E1 區的部分基因片段,這些基因能夠反式提供腺病毒輔助功能蛋白,有助于 AAV 載體在細胞內的復制、包裝過程。AAV-293 細胞具有高效的轉染性能,無論是脂質體轉染、電穿孔轉染還是病毒感染,都能獲得較高的轉染效率,使得外源基因能夠高效導入細胞。同時,該細胞系具備良好的病毒載體生產能力,能夠支持多種血清型 AAV 載體的包裝,且包裝出的 AAV 病毒顆粒具有較高的滴度和感染活性。在細胞增殖方面,AAV-293 細胞生長速度較快,在適宜培養條件下,細胞倍增時間約為 24 - 36 小時,能夠在短時間內獲得大量細胞用于病毒載體生產,但其在長期傳代過程中,細胞的生長特性和病毒載體生產能力可能會出現一定程度的波動。
培養 AAV-293 腺病毒轉化的人胚腎細胞系需要遵循嚴格的操作規范。常用含 10% 優質胎牛血清的 DMEM 培養基作為基礎培養體系,胎牛血清提供細胞生長和代謝所需的各類營養成分、生長因子和激素;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,防止細菌污染;根據實驗需求,還可補充谷an酰胺等營養物質,維持細胞良好狀態。將細胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養箱中,模擬人體生理環境,維持細胞內酸堿平衡與酶活性。當細胞匯合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實時觀察,避免過度消化損傷細胞,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,再轉移至液氮中長期保存。在培養過程中,需定期通過臺盼藍染色檢測細胞活力,利用 Western blot 檢測腺病毒 E1A 等標志物的表達,確保細胞特性穩定。
在科研應用領域,AAV-293 細胞系發揮著不可替代的作用。在基因治療方面,它是生產臨床級 AAV 載體的核心工具細胞,用于制備攜帶治療性基因的 AAV 病毒載體,為遺傳性疾病、神經系統疾病等的基因治療提供載體來源,如用于治療脊髓性肌萎suo癥(SMA)的 Zolgensma 藥物,其 AAV 載體的生產就依賴 AAV-293 細胞。在病毒學研究中,該細胞系用于研究 AAV 病毒的生命周期、病毒 - 細胞相互作用機制,幫助科研人員深入了解 AAV 病毒的生物學特性,優化病毒載體設計。此外,AAV-293 細胞還用于重組蛋白表達、基因編輯工具的遞送研究等,在生命科學和生物醫藥領域具有廣闊的應用前景。
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