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BY-0733 C3H 10T1/2 2A6小鼠胚胎成纖維細胞系

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C3H 10T1/2 2A6小鼠胚胎成纖維細胞系

C3H 10T1/2 2A6小鼠胚胎成纖維細胞系源自 C3H 小鼠 14-17 天胚胎組織,因具有潛能與低自發轉化特性,成為細胞分化、致癌作用及輻射生物學研究的標準模型,在生命科學領域應用廣泛。

該細胞系呈現典型的成纖維細胞形態與表型特征。顯微鏡下,細胞呈長梭形,貼壁生長時排列有序,呈平行束狀分布,胞質均勻,細胞核呈橢圓形,核仁不明顯,符合胚胎成纖維細胞的形態學特征。免疫表型分析顯示,細胞高表達成纖維細胞標志物波形蛋白(Vimentin)和 α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA),不表達上皮細胞標志物細胞角蛋白,明確其間質細胞屬性。與其他成纖維細胞系相比,其形態均一性更高,傳代至 20 代仍能保持穩定表型,為實驗重復性提供保障。
體外培養中,C3H 10T1/2 2A6 細胞展現出嚴格的生長調控特性。最適培養條件為含 10% 胎牛血清的 MEM 培養基,37℃、5% CO?環境下,傳代周期約 48-72 小時,細胞密度達到 1×10?個 /cm2 時因接觸抑制停止增殖,這一特性使其成為研究細胞周期調控的理想工具。其對血清濃度變化敏感,血清濃度降至 1% 時,90% 以上細胞進入 G0 期,恢復血清供應后可同步進入增殖期,便于開展細胞周期同步化實驗。此外,該細胞系凍存復蘇效率高,液氮凍存后復蘇存活率超過 85%,能長期穩定傳代。
多向分化潛能是 C3H 10T1/2 2A6 細胞的核心優勢。在特定誘導條件下,可分化為脂肪細胞、骨細胞和軟骨細胞等多種間質細胞類型:用甲基異丁基黃piao呤、地塞mi松和胰島素聯合處理 2 周,80% 以上細胞可分化為脂肪細胞,胞質內形成明顯脂滴,高表達脂肪分化標志物 PPARγ 和脂聯素;用 β- 甘油lin酸鈉和抗壞血酸誘導 4 周,細胞可分化為骨細胞,形成礦化結節,表達骨鈣素和堿性磷酸酶。這種多向分化能力使其成為研究間質干細胞分化機制的經典模型。
在致癌作用研究中,C3H 10T1/2 2A6 細胞的應用具有里程碑意義。其自發轉化率極低(<0.1%),經物理、化學或病毒等致癌因素處理后,轉化頻率顯著升高,且轉化表型穩定。轉化細胞表現為接觸抑制消失、錨定非依賴性生長(軟瓊脂集落形成率> 30%)及裸鼠致瘤性。通過對比轉化前后細胞的基因變化,發現致癌物質可誘導 Ras 基因突變和 p53 抑癌基因失活,為解析癌變分子機制提供直接證據,該模型被廣泛用于致癌物篩選與致癌機制研究。
輻射生物學研究中,C3H 10T1/2 2A6 細胞是評估輻射致癌效應的金標準。其對電離輻射高度敏感,經 γ 射線照射后,細胞存活率呈劑量依賴性下降,且能形成輻射誘導的轉化灶,轉化頻率與輻射劑量正相關。研究證實,輻射通過誘導 DNA 損傷和基因組不穩定性,激活 ATM/p53 信號通路,導致細胞周期阻滯或凋亡,未修復的損傷可引發細胞惡性轉化,該模型為輻射防護劑篩選和輻射致癌風險評估提供了重要工具。
在細胞生物學基礎研究中,該細胞系常用于探究細胞信號通路對分化的調控。研究發現,Wnt/β-catenin 通路在其骨分化中起關鍵作用 —— 激活該通路可促進骨鈣素表達,抑制脂肪分化;而 PPARγ 激動劑則可特異性誘導脂肪分化,抑制骨分化,揭示了分化命運決定的分子開關機制。此外,其可用于細胞外基質重塑研究,能分泌 Ⅰ 型膠原蛋白和纖連蛋白,TGF-β 處理可使膠原蛋白合成增加 2 倍,這種調控依賴于 Smad2/3 信號通路的激活。
在生物制藥領域,C3H 10T1/2 2A6 細胞可用于評估藥物對細胞分化的影響。例如,中藥成分姜黃素可抑制其脂肪分化,促進骨分化,這種雙向調節作用與調控 PPARγ 和 Runx2 表達相關,為開發治療骨質疏松和肥胖癥的藥物提供了實驗依據。同時,其對細胞毒性藥物的敏感性使其可用于藥物安全性評價,通過檢測藥物處理后的細胞活力和凋亡率,篩選低毒性候選化合物。
隨著基因編輯技術的發展,CRISPR/Cas9 修飾的 C3H 10T1/2 2A6 細胞模型可精準研究特定基因在分化和轉化中的作用。例如,敲除 β-catenin 基因后,細胞骨分化能力wan全喪失,證實其在骨形成中的必要性。這種基因工程化細胞系進一步拓展了其在功能基因組學研究中的應用,為解析復雜生物學過程提供了更精準的工具。

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