BY-0571 RAG小鼠腎腺癌細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0571
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/8 14:28:00
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RAG小鼠腎腺癌細胞系
RAG小鼠腎腺癌細胞系源自 RAG 基因敲除小鼠的自發性腎腺癌，因 RAG1/2 基因缺失導致 T、B 淋巴細胞發育障礙，成為兼具腫瘤特性與免疫缺陷背景的du特研究模型。其在腎癌發病機制、免疫逃逸及細胞治療研究中展現出不可替代的價值，為連接腫瘤生物學與免疫缺陷模型搭建了關鍵橋梁。
顯微鏡下，該細胞呈貼壁生長，形態以多邊形和上皮樣為主，宛如覆蓋在培養皿表面的 “不規則鱗片”。細胞直徑約 18-25 微米，較普通腎小管上皮細胞略大；胞質豐富，可見散在的脂滴樣空泡 —— 這是腎腺癌的典型胞質特征；細胞核呈橢圓形或不規則形，核質比約 1:2，染色質呈粗顆粒狀，核仁清晰（1-2 個），偶見雙核細胞，顯示出腫瘤細胞的異型性。細胞增殖速度中等，倍增時間約 48-60 小時，當融合度達 80%-90% 時需傳代，傳代時通過溫和吹打結合短時 EDTA 處理使細胞脫落，按 1:4 比例接種，連續培養 40 代仍能保持穩定的腫瘤表型。
培養 RAG 小鼠腎腺癌細胞需模擬腎臟微環境。基礎培養基選用 DMEM/F12 混合液，其高糖成分（4.5g/L）可滿足腎癌細胞的能量需求；添加 10% 胎牛血清提供生長因子，其中血清中的表皮生長因子（EGF）對維持細胞的上皮特性至關重要。培養環境需嚴格控制在 37℃、5% CO?，pH 值穩定在 7.3-7.5，通過培養基中的酚紅指示劑監測酸堿變化。與普通腎癌細胞系不同，該細胞對血清批次敏感，需篩選能維持其腫瘤標志物（如碳酸酐酶 IX、VEGF）表達的血清，每批血清需經 Western blot 驗證，確保標志物表達量波動不超過 20%。
在腎癌發病機制研究中，該細胞系是解析基因突變與腫瘤進展關系的理想工具。其保留了原發腫瘤的關鍵突變特征，如 VHL 基因失活 —— 這與人類透明細胞腎癌的常見突變高度吻合。實驗顯示，該細胞在缺氧條件下（1% O?）的 HIF-1α 蛋白穩定性顯著提高，下游靶基因 VEGF、GLUT1 的表達量上調 4-6 倍，wan美模擬了腎癌的缺氧適應機制。通過 CRISPR 技術修復 VHL 基因后，細胞的克隆形成能力下降 50%，裸鼠成瘤體積縮小 60%，直接證明 VHL 失活在腎癌發生中的驅動作用。
在免疫逃逸研究中，RAG 小鼠腎腺癌細胞的免疫缺陷宿主背景提供了du特優勢。由于宿主缺乏功能性 T、B 細胞，可單獨評估腫瘤細胞與固有免疫細胞的相互作用。例如，該細胞高表達 PD-L1 分子，與巨噬細胞表面 PD-1 結合后，可抑制巨噬細胞的吞噬活性（吞噬率下降 35%），并誘導其向 M2 型極化（IL-10 分泌增加 2 倍）。這一發現為腎癌 “劫持” 固有免疫的機制提供了直接證據，也解釋了為何部分腎癌患者對 PD-1 抑制劑單藥治療響應率低。
在細胞治療研究中，該細胞系是驗證過繼性細胞療法的理想模型。因其來源的宿主無 T 細胞，可避免移植物抗宿主病（GVHD），直接評估輸注的 CAR-T 細胞活性。實驗顯示，靶向碳酸酐酶 IX 的 CAR-T 細胞與該細胞共培養時，殺傷效率達 85% 以上，且在荷瘤 RAG 小鼠中可使腫瘤體積縮小 70%，生存期延長 2 倍。這一模型為優化 CAR-T 細胞的抗原靶點和輸注劑量提供了可靠的實驗數據。
在藥物篩選領域，該細胞系可用于評估免疫聯合療法的效果。例如，將抗血管生成藥物（如舒尼替尼）與 PD-L1 抗體聯用，通過檢測細胞分泌的細胞因子（如 IFN-γ、TNF-α）和腫瘤微環境中的血管密度，發現聯合治療可使腫瘤壞死面積增加 40%，遠高于單藥治療（15%-20%）。這種 “抗血管 + 免疫” 的協同效應在該模型中得到清晰驗證，為臨床方案優化提供參考。
培養過程中，需特別注意該細胞的貼壁依賴性較強，傳代時避免過度消化導致細胞損傷。凍存時使用含 15% DMSO 的血清凍存液，采用程序降溫盒降至 - 80℃后轉入液氮，復蘇存活率可達 75% 以上。與普通腎癌細胞系相比，其對hua療藥物（如shun鉑）敏感性較低，IC50 值約為普通細胞的 2 倍，這與其高表達 ABC 轉運蛋白（如 ABCG2）有關，為研究腎癌耐藥機制提供了天然模型。
前沿研究中，該細胞系的應用持續拓展。在類器官構建中，將其與腎間質細胞共培養，可形成具有腎小管樣結構的三維腫瘤模型，用于研究腫瘤 - 基質相互作用對藥物響應的影響；在單細胞測序中，解析其異質性亞群，發現高表達 CD133 的細胞亞群具有更強的成瘤能力和耐藥性，為識別腎癌干細胞提供了標志物；在基因編輯領域，通過敲入熒光素酶基因，可實時監測荷瘤小鼠的腫瘤生長動態，為評估藥物的體內療效提供可視化工具。
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