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BY-0201 LS174T人結直腸腺癌細胞系

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LS174T人結直腸腺癌細胞系
      LS174T人結直腸腺癌細胞系源自男性結腸腺癌患者的腫瘤組織,于 20 世紀 70 年代初被成功建立。在顯微鏡下觀察,其細胞呈現典型的上皮樣形態,細胞相互連接,形成緊密的單層或簇狀結構,細胞大小和形態存在一定差異,這種異質性與人體結直腸腺癌腫瘤組織的細胞特征高度相似。其核型為超二倍體,存在多個染色體畸變,同時攜帶多種關鍵基因突變,例如 KRAS 基因突變、p53 通路相關基因缺失等,這些遺傳特征不僅賦予細胞惡性增殖的能力,也為腫瘤研究提供了豐富的靶點。
      HCT - 15 細胞的培養需特定且精細的條件。常用 RPMI - 1640 培養基,添加 10% 優質胎牛血清和 1% 雙抗,以滿足細胞生長所需營養,維持無菌環境。其中,胎牛血清富含細胞生長必需的生長因子、激素、結合蛋白等物質,能有效促進細胞貼壁和增殖;雙抗則防止細菌和真菌污染,保障細胞健康生長。培養環境為 37℃、5% 二氧化碳與 95% 空氣的混合氣體,濕度保持在 70% - 80%。37℃模擬人體體溫,5% 二氧化碳可維持培養基的 pH 穩定,適宜的濕度避免培養基過快蒸發。
       細胞貼壁生長,當匯合度達 80% - 90% 時需傳代。傳代使用 0.25%(w/v)胰dan白酶 - 0.53mM EDTA 消化,由于細胞貼壁較緊,消化時間相對較長,約 1 - 2 分鐘。在消化過程中,需在顯微鏡下密切觀察細胞形態變化,當細胞變圓、間隙增大時,及時終止消化,避免過度消化損傷細胞。若出現消化困難的情況,可適當提高胰dan白酶濃度或延長消化時間,但需格外注意觀察。消化后,需迅速加入含血清的培養基中和胰dan白酶活性,防止殘留胰dan白酶繼續作用。傳代比例一般為 1:2 - 1:4 ,傳代后需定期更換培養基,保證細胞有充足的營養供應。凍存時,凍存液采用 90% 胎牛血清加 10% 二甲基亞砜,按 4℃ 10 分鐘、-20℃ 2 小時、-80℃過夜后轉至液氮的程序保存,每一步降溫都能減少細胞內冰晶形成,保護細胞活性。值得注意的是,復蘇細胞時,需將凍存管迅速放入 37℃水浴中快速解凍,以減少低溫對細胞的損傷。若復蘇后細胞活力不佳,可嘗試降低傳代密度,給予細胞更寬松的生長環境。
      在科學研究中,HCT - 15 細胞系應用廣泛。利用該細胞系構建的耐藥模型,如 HCT - 15/5FU 細胞系,是研究氟尿*啶耐藥機制的重要工具。研究發現,HCT - 15/5FU 細胞的耐藥涉及胸苷酸合成酶上調、二氫嘧啶脫氫酶活性增強、藥物外排與解毒系統激活等多個方面。通過對 HCT - 15 細胞的研究,不僅能深入探索腫瘤發生發展機制,還能進行抗癌藥物篩選、評估藥物療效。例如,在前沿研究中,科研團隊將新型免疫檢查點抑制劑與傳統hua療藥物聯合作用于 HCT - 15 細胞,觀察到兩者協同作用顯著增強了對癌細胞的殺傷效果,為結直腸癌的免疫 - hua療聯合治療策略提供了理論依據。還有研究團隊運用 HCT - 15 細胞測試新型納米靶向藥物,該藥物能夠精準識別并作用于癌細胞表面的特定受體,相比傳統藥物,其對 HCT - 15 細胞的抑制效果更好且副作用更小。此外,通過基因編輯技術對 HCT - 15 細胞的特定基因進行敲除或過表達,可探究基因在腫瘤發展中的功能,從而發現新的治療靶點,為結直腸癌的臨床治療提供更多潛在方向。

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