BY-0476 CHO倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-0476
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- 更新時(shí)間 2025/7/24 16:10:27
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CHO倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系
CHO倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系是生物制藥與生物技術(shù)領(lǐng)域的 “主力細(xì)胞系”，源于中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢組織，因具備高效表達(dá)重組蛋白、遺傳穩(wěn)定性強(qiáng)及易于基因編輯等特性，成為重組藥物生產(chǎn)與蛋白功能研究的核心工具，應(yīng)用價(jià)值橫跨基礎(chǔ)研究與產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。
該細(xì)胞系建立于 20 世紀(jì) 50 年代，由美國(guó)科學(xué)家 Puck 從成年中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢皮質(zhì)組織中分離獲得。原代細(xì)胞經(jīng)多次傳代篩選，形成形態(tài)均一的上皮樣細(xì)胞群，早期用于遺傳學(xué)研究，20 世紀(jì) 80 年代后因被成功用于表達(dá)重組人gan擾素，逐漸成為生物制藥的shou選宿主細(xì)胞，目前已衍生出 CHO-K1、CHO-S、CHO-DG44 等多個(gè)亞型，各亞型在蛋白表達(dá)效率與代謝特性上略有差異。
生物學(xué)特性方面，CHO 細(xì)胞呈上皮樣形態(tài)，體外培養(yǎng)時(shí)為多邊形或短梭形，貼壁生長(zhǎng)，部分亞型（如 CHO-S）可適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。細(xì)胞核大而明顯，呈橢圓形，位于細(xì)胞中央，胞質(zhì)豐富，含多個(gè)線粒體以支持高強(qiáng)度蛋白合成。生長(zhǎng)特性上，其倍增時(shí)間約為 18-24 小時(shí)，在含 10% 胎牛血清的 DMEM 或 F-12 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)迅速，最適培養(yǎng)條件為 37℃、5% CO?環(huán)境，懸浮培養(yǎng)時(shí)需添加抗結(jié)團(tuán)劑以維持單細(xì)胞狀態(tài)，傳代至 100 代仍保持核型穩(wěn)定，這一特性遠(yuǎn)超其他哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。
功能特性上，CHO 細(xì)胞的核心優(yōu)勢(shì)在于重組蛋白表達(dá)能力。其具備完整的蛋白折疊與翻譯后修飾系統(tǒng)，可對(duì)表達(dá)的重組蛋白進(jìn)行糖基化、磷酸化等修飾，修飾模式接近人類細(xì)胞，解決了原核表達(dá)系統(tǒng)的蛋白活性問(wèn)題。研究顯示，通過(guò)基因工程改造的 CHO 細(xì)胞，單克隆抗體表達(dá)量可達(dá) 10-15g/L，遠(yuǎn)超骨髓瘤細(xì)胞系，且表達(dá)產(chǎn)物的均一性高，免疫原性低。同時(shí)，該細(xì)胞系對(duì)葡萄糖的代謝效率高，可在無(wú)血清培養(yǎng)基中高密度培養(yǎng)，為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。
在研究應(yīng)用中，CHO 細(xì)胞系的價(jià)值體現(xiàn)在多個(gè)維度。在生物制藥領(lǐng)域，全球 70% 以上的重組蛋白藥物（如單克隆抗體、胰島素、生長(zhǎng)激素）均由其生產(chǎn)，阿達(dá)木單抗、利妥xi單抗等重磅藥物的生產(chǎn)工藝均以 CHO 細(xì)胞為核心，其高表達(dá)效率與產(chǎn)物安全性經(jīng)過(guò)了數(shù)十年臨床驗(yàn)證。在蛋白功能研究中，CHO 細(xì)胞因背景蛋白干擾少，常被用于外源基因的過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，可解析膜蛋白的結(jié)構(gòu)功能或酶的催化機(jī)制，G 蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）的信號(hào)傳導(dǎo)研究中，CHO 細(xì)胞是zui常用的表達(dá)系統(tǒng)。
此外，該細(xì)胞系在基因編輯技術(shù)驗(yàn)證中也具重要價(jià)值。其基因組序列明確，且對(duì)鋅指核酸酶（ZFN）、CRISPR/Cas9 等編輯工具的兼容性好，通過(guò)敲除或敲入特定基因，可構(gòu)建缺陷型或報(bào)告型細(xì)胞系，用于藥物靶點(diǎn)驗(yàn)證或高通量篩選。例如，敲除 CHO 細(xì)胞的 GS（谷an酰胺合成酶）基因后，可建立依賴外源谷an酰胺的篩選系統(tǒng)，顯著提高重組細(xì)胞株的篩選效率。
培養(yǎng)與保存 CHO 細(xì)胞需根據(jù)亞型調(diào)整策略。貼壁培養(yǎng)的 CHO-K1 適合用 0.25% yi酶 - EDTA 消化傳代，當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時(shí)傳代，避免過(guò)度密集導(dǎo)致接觸抑制；懸浮培養(yǎng)的 CHO-S 則需控制攪拌速度（100-150rpm），使用化學(xué)成分明確的無(wú)血清培養(yǎng)基以減少污染風(fēng)險(xiǎn)。長(zhǎng)期保存時(shí)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，用含 10% DMSO 的凍存液梯度降溫后存入液氮，復(fù)蘇存活率可達(dá) 90% 以上，且復(fù)蘇后 24 小時(shí)即可恢復(fù)正常生長(zhǎng)速率。
與其他表達(dá)系統(tǒng)相比，CHO 細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)在于：蛋白修飾接近人類、表達(dá)量高、可規(guī)?；囵B(yǎng)，且無(wú)病毒污染風(fēng)險(xiǎn)（與人類細(xì)胞系相比）；局限性在于培養(yǎng)成本較高，部分復(fù)雜糖基化修飾仍與人類細(xì)胞存在差異。為此，科研人員通過(guò)基因編輯優(yōu)化其糖基轉(zhuǎn)移酶表達(dá)，已大幅縮小這一差距。
總之，CHO 倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系憑借其卓yue的重組蛋白表達(dá)能力與遺傳穩(wěn)定性，成為連接基礎(chǔ)研究與生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵紐帶，推動(dòng)了數(shù)千種重組藥物的研發(fā)上市，至今仍是生物技術(shù)領(lǐng)域不可替代的核心工具，其技術(shù)迭代持續(xù)yin領(lǐng)生物制藥行業(yè)的發(fā)展。
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