BY-0894 13D8小鼠雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0894
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/21 14:37:33
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13D8小鼠雜交瘤細胞系
13D8小鼠雜交瘤細胞系是制備特定單克隆抗體及研究 B 淋巴細胞雜交瘤技術的重要模型，以穩定分泌抗特定抗原的單克隆抗體、貼壁生長特性及抗體生產的高效性為核心優勢，在免疫學檢測、抗原表位分析及疾病診斷試劑研發中應用廣泛，為單克隆抗體的制備與應用提供了可靠實驗工具。
來源與背景：該細胞系源自 BALB/c 小鼠脾臟 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合產物，于 20 世紀 80 年代通過雜交瘤技術建立。雜交瘤技術通過將能產生特異性抗體的 B 淋巴細胞與無限增殖的骨髓瘤細胞融合，獲得既能分泌特異性抗體又能無限增殖的細胞系，13D8 細胞系便是這一技術的典型應用成果。其分泌的單克隆抗體可特異性識別某種抗原（如特定腫瘤標志物或病原體抗原），因抗體的高特異性和均一性，成為免疫學實驗及臨床診斷的重要工具，至今仍是單克隆抗體制備領域的常用細胞系之一。
細胞特性：形態上呈現典型的雜交瘤細胞特征，貼壁生長時呈上皮樣或多邊形，細胞質豐富，細胞核大而清晰，核質比約 1:1.5，可見雙核或多核細胞（約 8%），體現雜交瘤細胞的融合特性。核心特性突出：抗體分泌穩定，可持續分泌針對特定抗原的 IgG 型單克隆抗體，分泌量達 15-20μg/10?細胞 / 24h，連續傳代 50 次后抗體分泌能力無明顯下降；增殖能力較強，體外培養倍增時間約 48-54 小時，克隆形成率達 45%，接種于同源小鼠腹腔可形成腹水，腹水中抗體濃度達 5-10mg/ml，遠高于培養液中的抗體濃度；特異性明確，分泌的單克隆抗體與靶抗原的結合常數（Kd）可達 10??-10?1?M，交叉反應率 < 1%，確保檢測結果的準確性。傳代時采用常規方法處理，傳代比例 1:3-1:4，細胞密度達 70%-80% 時需及時傳代，過度密集會導致抗體分泌量下降 20%。
培養條件：適宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培養基，添加 1% 雙抗，培養環境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度。關鍵培養要點：血清質量影響顯著，需使用優質胎牛血清，低質量血清會使細胞活力下降 30%，抗體分泌量減少 40%；抗體生產優化，在無血清培養基中添加胰島素、轉鐵蛋白等添加劑，可維持細胞生長并減少血清對抗體純化的干擾，抗體純度可達 95% 以上；腹水制備條件，給小鼠腹腔注射細胞前需預先注射降植烷，7 天后接種 1×10?細胞，10-14 天可收集腹水，每只小鼠可獲 5-10ml 腹水。凍存推薦使用含 10% DMSO 的胎牛血清凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 48 小時貼壁率達 85%，抗體分泌能力恢復 90% 以上。
檢測鑒定：經微生物篩查，無細菌、真菌、支原體污染，符合雜交瘤細胞質量標準。抗體類型鑒定顯示為 IgG1 亞型，輕鏈為 κ 型；通過 ELISA、Western blot 等方法證實其與靶抗原的特異性結合，不與其他相關抗原發生交叉反應。染色體核型分析顯示其染色體數目為 90-100 條，是親本 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞染色體數的總和，符合雜交瘤細胞的染色體特征。功能驗證中，該抗體可用于免疫組化檢測，能特異性識別組織中的靶抗原，染色陽性率與預期結果一致，證實其應用價值。
應用領域：在免疫學檢測方面，13D8 細胞系分泌的單克隆抗體可用于建立 ELISA 檢測試劑盒，檢測靈敏度達 0.1ng/ml，廣泛應用于臨床樣本中靶抗原的定量分析；在抗原表位分析中，通過該抗體與抗原的結合實驗，可確定抗原上的特異性表位，為疫苗設計提供關鍵信息。在疾病診斷研究中，利用其抗體的高特異性，可制備免疫熒光探針，用于病理切片中靶抗原的定位檢測，診斷符合率達 90% 以上。此外，該細胞系可用于單克隆抗體制備工藝優化，通過懸浮培養條件的改良，使抗體產量提升 2-3 倍，降低生產成本。
與其他雜交瘤細胞系相比，13D8 細胞系的優勢在于其抗體分泌的穩定性高、特異性強及應用范圍廣，抗體效價遠高于普通雜交瘤細胞系（約 2-3 倍）。通過該細胞系的研究與應用，已開發出多種基于其抗體的診斷試劑，在臨床檢測中發揮重要作用，為免疫學研究及疾病診斷提供了有力支持。
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