BY-0744 SH2小鼠雜交瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0744
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- 更新時(shí)間 2025/7/10 12:16:40
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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SH2小鼠雜交瘤細(xì)胞系
SH2小鼠雜交瘤細(xì)胞系是通過將免疫小鼠的 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合構(gòu)建的雜交細(xì)胞系，兼具 B 淋巴細(xì)胞的抗體分泌能力與骨髓瘤細(xì)胞的無限增殖特性，在單克隆抗體制備、免疫檢測及抗原表位分析中發(fā)揮核心作用。
該細(xì)胞系具有du特的形態(tài)與功能特征。顯微鏡下，細(xì)胞呈圓形或類圓形，以懸浮生長為主，部分細(xì)胞聚集成松散的小簇，核質(zhì)比高，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，染色質(zhì)疏松，可見 1-2 個明顯核仁，胞質(zhì)豐富且呈嗜堿性，這些形態(tài)特征融合了 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的典型表型。作為雜交瘤細(xì)胞，其核心功能特征是能持續(xù)分泌特異性單克隆抗體 —— 通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測，培養(yǎng)上清中抗體濃度可達(dá) 10-50μg/mL，且抗體亞型穩(wěn)定（多為 IgG1 或 IgG2a），與親本 B 淋巴細(xì)胞識別的抗原表位高度一致，這種單克隆性使其能精準(zhǔn)靶向特定抗原，避免多克隆抗體的交叉反應(yīng)問題。
體外培養(yǎng)體系中，SH2 細(xì)胞展現(xiàn)出特殊的生長需求與穩(wěn)定性。最適培養(yǎng)條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素混合液預(yù)防污染，在 37℃、5% CO?環(huán)境下，細(xì)胞倍增時(shí)間約 24-36 小時(shí)，對數(shù)生長期細(xì)胞活力可達(dá) 90% 以上。其顯著特點(diǎn)是對營養(yǎng)條件敏感，血清質(zhì)量直接影響抗體分泌量 —— 優(yōu)質(zhì)胎牛血清可使抗體產(chǎn)量提升 30%，而使用無血清培養(yǎng)基時(shí)需添加胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白等生長因子維持活性。與親本骨髓瘤細(xì)胞相比，其生長速率稍慢，但抗體分泌能力穩(wěn)定，連續(xù)傳代 60 次后，抗體效價(jià)無明顯下降，凍存復(fù)蘇后抗體分泌特性可wan全恢復(fù)，復(fù)蘇存活率超過 85%，為長期制備單克隆抗體提供了可靠保障。
SH2 細(xì)胞的核心價(jià)值體現(xiàn)在單克隆抗體的規(guī)模化制備與應(yīng)用。作為雜交瘤技術(shù)的典型產(chǎn)物，其分泌的單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、均一性高的優(yōu)勢，可通過腹水誘導(dǎo)法或生物反應(yīng)器大規(guī)模生產(chǎn)：將 1×10?個細(xì)胞腹腔接種于 pristane 預(yù)處理的 BALB/c 小鼠，7-10 天可產(chǎn)生腹水，抗體濃度高達(dá) 5-10mg/mL，適用于實(shí)驗(yàn)室小規(guī)模制備；而使用攪拌式生物反應(yīng)器培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞密度可達(dá) 1×10? cells/mL，抗體產(chǎn)量穩(wěn)定在 20μg/mL，滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求。這些抗體廣泛用于蛋白質(zhì)純化（如親和層析柱制備）、免疫組化分析（特異性標(biāo)記組織中的靶抗原）及流式細(xì)胞術(shù)（細(xì)胞表面抗原檢測），在基礎(chǔ)研究與臨床診斷中不ke或缺。
在抗原表位鑒定研究中，SH2 細(xì)胞分泌的單克隆抗體是解析抗原結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵工具。通過片段表達(dá)與 ELISA 結(jié)合的方法，可定位抗體識別的精確表位 —— 將抗原蛋白的不同截短片段表達(dá)后，檢測 SH2 抗體的結(jié)合活性，能確定最小識別單元（通常為 6-12 個氨基酸殘基）。例如，針對腫瘤抗原的 SH2 抗體可識別其表面的線性表位，為肽疫苗設(shè)計(jì)提供關(guān)鍵信息；而對病毒蛋白的識別則可揭示中和抗體的作用位點(diǎn)，指導(dǎo)抗病du藥物研發(fā)。這種表位映射能力使其成為抗原功能研究的重要探針。
在免疫檢測技術(shù)開發(fā)中，SH2 細(xì)胞的單克隆抗體是構(gòu)建檢測體系的核心試劑。基于其抗體建立的雙抗體夾心法 ELISA，檢測靈敏度可達(dá) pg 級，如用于細(xì)胞因子檢測時(shí)，線性范圍為 10-1000pg/mL，批內(nèi)變異系數(shù)＜5%，顯著優(yōu)于多克隆抗體體系。在免疫印跡（Western blot）實(shí)驗(yàn)中，該抗體可特異性識別分子量對應(yīng)的靶蛋白條帶，無非特異性雜帶，信噪比高；而在免疫熒光實(shí)驗(yàn)中，能清晰標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞膜上的靶抗原，定位精度達(dá)亞細(xì)胞水平，這些特性使其成為蛋白質(zhì)定性與定位分析的金標(biāo)準(zhǔn)工具。
在疾病診斷與治療研究中，SH2 單克隆抗體具有轉(zhuǎn)化應(yīng)用潛力。針對病原體抗原的 SH2 抗體可開發(fā)快速診斷試紙條，如病毒感染檢測試紙條，通過膠體金標(biāo)記抗體與樣本中抗原的特異性結(jié)合，15 分鐘內(nèi)即可出結(jié)果，靈敏度與 PCR 方法相當(dāng)。在腫瘤靶向治療研究中，將 SH2 抗體與藥物偶聯(lián)構(gòu)建抗體 - 藥物偶聯(lián)物（ADC），可特異性遞送藥物至腫瘤細(xì)胞，體外實(shí)驗(yàn)顯示其對靶細(xì)胞的殺傷效率是游離藥物的 20 倍，而對正常細(xì)胞毒性降低 50%，這種靶向性為減少hua療副作用提供了新策略。
隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，SH2 細(xì)胞系可通過抗體工程改造拓展應(yīng)用邊界。利用 CRISPR/Cas9 技術(shù)敲除抗體恒定區(qū)基因后，可表達(dá)單鏈可變片段（scFv），分子量僅為完整抗體的 1/5，穿透力更強(qiáng)，適用于腫瘤深部成像；而導(dǎo)入人源化抗體基因片段，可降低鼠源抗體的免疫原性，為人源化單克隆抗體研發(fā)提供過渡模型。這些改造不僅保留 SH2 細(xì)胞的抗原識別特異性，還賦予抗體新的功能特性，進(jìn)一步擴(kuò)大了其在生物技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用范圍。
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