BY-0613 BNL CL.2小鼠胚胎肝細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0613
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/7/8 14:58:06
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BNL CL.2小鼠胚胎肝細胞系
BNL CL.2小鼠胚胎肝細胞系源自小鼠骨骼肌組織的肌肉母細胞瘤，因保留肌母細胞的核心特征且分化潛能穩定，成為肌肉生物學與腫瘤研究的重要模型。其du特的 “增殖 - 分化” 雙態性 —— 既能快速增殖維持腫瘤特性，又可被誘導形成肌管結構，為解析肌肉分化機制和肌肉腫瘤發生提供了理想工具。
顯微鏡下，G-7 細胞呈貼壁生長，形態兼具肌母細胞與腫瘤細胞的雙重特征。增殖期細胞多為梭形或多邊形，直徑約 15-20 微米，胞質內可見細絲狀肌動蛋白束，經免疫熒光染色后呈紅色平行排列；細胞核大而圓，核質比約 1:1.5，染色質疏松，核仁明顯（1-2 個），顯示出活躍的增殖活性。當誘導分化后，細胞逐漸融合形成多核肌管，長度可達 100-200 微米，肌球蛋白重鏈（MHC）表達量上調 5-8 倍，wan美模擬骨骼肌細胞的分化過程。細胞倍增時間約 30-36 小時，融合度達 70% 時需傳代，傳代時用 EDTA 溶液輕柔處理，按 1:4 比例接種，連續培養 50 代仍能保持分化潛能。
培養 G-7 細胞需模擬肌肉微環境。基礎培養基選用 DMEM（高糖），添加 20% 胎牛血清以維持增殖活性，其中血清中的胰島素樣生長因子 - 1（IGF-1）對抑制提前分化至關重要。培養環境需控制在 37℃、5% CO?，pH 值 7.2-7.4，通過酚紅指示劑監測酸堿變化。誘導分化時，需將血清濃度降至 2%，同時添加馬血清，此時細胞周期停滯在 G?/G?期，肌分化相關轉錄因子（如 MyoD、MyoG）表達量在 48 小時內上調 3-4 倍，肌管形成率可達 60% 以上。
在肌分化機制研究中，G-7 細胞系是解析肌細胞命運決定的關鍵模型。其分化過程嚴格遵循 “肌母細胞→成肌細胞→多核肌管” 的路徑，涉及多個信號通路的協同調控。實驗顯示，Wnt/β- 連環蛋白信號激活可使 MyoD 表達量增加 2 倍，加速肌管形成；而 Notch 信號持續激活則會抑制分化，使肌管形成率下降 50%。通過 RNA 干擾技術沉默 MyoG 基因，發現細胞無法完成多核融合，證實其在分化終末階段的不可替代作用。該細胞系還可用于研究肌wei縮相關機制，在腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）處理下，肌管出現明顯wei縮，肌動蛋白降解速率增加 3 倍，與肌wei縮患者的肌纖維變化高度一致。
在肌肉腫瘤研究中，G-7 細胞系因保留橫紋肌肉瘤的典型特征而被廣泛應用。其裸鼠成瘤率達 100%，腫瘤組織呈現胚胎型橫紋肌肉瘤的病理特征 —— 可見梭形瘤細胞與多核巨細胞交織，經 Desmin 免疫組化染色呈強陽性。研究發現，該細胞高表達胰島素樣生長因子結合蛋白 - 5（IGFBP-5），通過激活 PI3K/Akt 通路促進細胞增殖，抑制 IGFBP-5 后，細胞增殖率下降 40%，裸鼠腫瘤體積縮小 50%，為橫紋肌肉瘤的靶向治療提供了潛在靶點。此外，該細胞系對相關藥物的敏感性與臨床樣本高度吻合，為藥物篩選提供了可靠模型。
在再生醫學研究中，G-7 細胞系可用于評估肌組織修復策略。將其與生物支架復合植入小鼠肌肉缺損模型，可見細胞在體內存活并分化為肌管樣結構，缺損區域肌肉力量恢復至正常水平的 40%。實驗證實，支架釋放的肝細胞生長因子（HGF）可促進細胞遷移與分化，使肌管形成數量增加 2 倍，為組織工程肌構建提供了優化方案。同時，該細胞分泌的肌營養因子（如肌生成抑制素）可調節周圍正常肌細胞的增殖，為研究腫瘤微環境對肌肉再生的影響提供了新視角。
培養過程中，G-7 細胞對血清批次敏感，優質血清需能維持其在低濃度（2%）下的分化能力。凍存時使用含 10% DMSO 的血清凍存液，梯度降溫后液氮保存，復蘇存活率達 75% 以上。與正常肌母細胞相比，其對氧化應激更敏感，H?O?處理后活性氧（ROS）積累量是正常細胞的 2 倍，這一特性為研究肌肉腫瘤的氧化代謝機制提供了線索。
前沿研究中，該細胞系的應用持續拓展。通過單細胞測序發現，其包含增殖型（占 60%）與預分化型（占 40%）兩個亞群，預分化型細胞高表達肌分化標志物，為理解腫瘤異質性提供了新證據；利用 CRISPR 技術敲入熒光蛋白基因，可實時追蹤細胞在體內的分化動態，為肌腫瘤轉移路徑研究提供可視化工具；在類器官模型中，與神經細胞共培養可模擬肌 - 神經連接形成過程，為肌wei縮側索硬化癥（ALS）的研究提供了三維模型。
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