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BY-0724 Fox-NY小鼠骨髓瘤細胞系

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Fox-NY小鼠骨髓瘤細胞系

Fox-NY小鼠骨髓瘤細胞系源于 BALB/c 小鼠的漿細胞惡性轉化,是雜交瘤技術中制備單克隆抗體的重要工具細胞,憑借優異的融合性能與穩定的遺傳特性,在免疫學研究和生物制藥領域占據重要地位。

該細胞系具有典型的骨髓瘤細胞形態與表型。顯微鏡下,細胞呈圓形或類圓形,以懸浮生長為主,部分細胞聚集成小簇,核質比高,染色質呈細顆粒狀,可見 1-2 個清晰核仁,胞質嗜堿性,符合漿細胞惡變后的形態特征。免疫表型分析顯示,其表達 B 淋巴細胞分化抗原 CD138( Syndecan-1)和 CD38,不表達免疫球蛋白重鏈和輕鏈,這種抗體分泌缺陷型表型是其適用于雜交瘤制備的關鍵前提 —— 與分泌抗體的 B 淋巴細胞融合后,雜交瘤細胞可專一性表達目標抗體,避免自身抗體的干擾。
在體外培養體系中,Fox-NY 細胞展現出良好的生長適應性。最適培養條件為含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養基,在 37℃、5% CO?飽和濕度環境下,細胞增殖穩定,傳代周期約 36-48 小時,對數生長期細胞活力可達 90% 以上。與其他骨髓瘤細胞系相比,其對培養環境波動的耐受性更強,在血清濃度 5%-15% 范圍內均能維持正常增殖,這一特性降低了培養操作的難度。此外,該細胞系凍存復蘇性能優異,經液氮凍存 6 個月后復蘇,存活率仍可保持 80% 以上,便于長期保存與規模化應用。
Fox-NY 細胞的核心優勢體現在雜交瘤制備中的高效性。其攜帶次黃piao呤磷酸核糖轉移酶(HPRT)缺陷突變,在含氨基蝶呤、次黃piao呤和胸腺嘧啶的選擇培養基中無法存活,而免疫后的小鼠脾臟 B 淋巴細胞雖具備 HPRT 活性,但體外存活時間有限(通常不超過 2 周)。兩者融合形成的雜交瘤細胞,既繼承了 Fox-NY 細胞的無限增殖能力,又獲得 B 淋巴細胞的 HPRT 功能,可在選擇培養基中選擇性存活,這一篩選機制能高效剔除未融合的親本細胞與自身融合細胞,顯著提高雜交瘤克隆的篩選效率。
在單克隆抗體制備流程中,Fox-NY 細胞的應用貫穿關鍵環節。經抗原免疫的小鼠脾臟細胞與該細胞在聚乙二醇(PEG)介導下融合后,通過選擇培養基培養 10-14 天,可獲得初步雜交瘤克隆。隨后采用有限稀釋法進行單克隆化培養,結合 ELISA 檢測抗體特異性與效價,最終篩選出能穩定分泌目標抗體的細胞株。例如,在抗細胞因子單克隆抗體制備中,Fox-NY 細胞與免疫小鼠的 B 淋巴細胞融合后,可快速獲得能特異性結合 IL-6、TNF-α 等因子的雜交瘤,為炎癥疾病的診斷與治療提供關鍵試劑。
除抗體研發外,Fox-NY 細胞在腫瘤生物學研究中也有重要價值。作為漿細胞惡性轉化的模型,其可用于探究多發性骨髓瘤的發病機制 —— 研究發現,該細胞系中 STAT3 信號通路持續激活,通過上調 Mcl-1 等抗凋亡基因維持細胞存活,這一機制與人類多發性骨髓瘤的分子特征高度相似,為開發 STAT3 抑制劑提供了理想的篩選模型。
在生物制藥領域,Fox-NY 細胞衍生的雜交瘤可通過大規模懸浮培養生產單克隆抗體。其分泌的抗體具有特異性強、親和力高的特點,廣泛應用于醫學診斷(如病原體檢測、腫瘤標志物篩查)和靶向治療(如自身免疫病的抗體藥物)。近年來,通過基因工程改造 Fox-NY 細胞,使其表達人源化抗體恒定區,可有效降低鼠源抗體引發的免疫排斥反應,推動單克隆抗體藥物的臨床轉化。
此外,該細胞系在免疫學基礎研究中也發揮作用。將特定抗原基因導入 Fox-NY 細胞后,可作為抗原呈遞細胞研究 B 細胞的活化機制;通過與 T 細胞共培養,能觀察骨髓瘤細胞對免疫細胞的抑制作用,解析腫瘤微環境中的免疫逃逸策略,為免疫調節藥物的研發提供理論依據。
隨著細胞培養技術的發展,Fox-NY 細胞的無血清培養體系日趨成熟,結合生物反應器的規模化培養,可實現單克隆抗體的高效生產,進一步提升其在生物制藥領域的應用價值,為抗體藥物的研發與生產提供堅實支撐。

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